Concentrația acidului ribonucleic (ARN) este o măsură a cât de mult din acest material genetic este prezent într-o probă. Acest acid nucleic este unul dintre elementele de bază ale vieții, esențial pentru funcționarea organismelor, de la balene până la pisici. Poate fi analizat în testare pentru o varietate de motive, inclusiv scopuri de diagnostic, cercetare și analiză criminalistică. Înainte de a putea fi testat, trebuie să fie procesat și verificat cu atenție pentru a confirma că proba este de bună integritate și va produce rezultate precise.
În timpul procesării, tehnicienii extrag ARN dintr-o probă pentru a-l putea analiza. Aceasta poate implica un tratament cu enzime care elimină acidul dezoxiribonucleic (ADN) și proteinele care pot fi prezente în probă. Sunt necesare controale atente pentru a limita șansele de contaminare și pentru a păstra cât mai mult ARN. Pentru acest proces pot fi folosite articole din sticlă specializate și materiale plastice de laborator, iar tehnicienii urmează, de asemenea, o procedură standard de laborator pentru consecvență.
Abordarea clasică pentru măsurarea concentrației de ARN implică trecerea unei probe printr-un spectrofotometru, un dispozitiv care măsoară absorbția luminii. Citirile pot oferi informații despre cât de mult ARN este prezent pe baza cât de multă lumină este absorbită la anumite lungimi de undă. Acest lucru poate indica, de asemenea, dacă contaminanții sunt prezenți într-o probă, deoarece alte materiale absorb lumina în lungimi de undă diferite. Astfel, testul poate îndeplini o funcție dublă prin cuantificarea ARN-ului și evaluarea contaminării acestuia.
O altă opțiune este să adăugați un colorant la probă și să îl expuneți la lumină pentru a vedea dacă colorantul are fluorescență și cât de intens. Coloranții se pot lega strâns de acizii nucleici pentru a oferi informații despre concentrațiile acestora. Un defect al acestei metode este că valorile concentrației de ARN pot fi oprite dacă proba conține și ADN sau alte impurități, deoarece colorantul se poate lega și de acestea. Tehnicienii pot folosi această opțiune pentru a determina concentrația de ARN numai dacă sunt siguri că proba este foarte pură pentru a evita obținerea de rezultate false.
Dacă concentrația de ARN este prea mică, este posibil ca proba să nu fie utilizabilă. S-ar putea să nu fie suficiente pentru a rula teste și a verifica rezultatele, de exemplu. O posibilitate crescută de eroare poate fi, de asemenea, o preocupare, deoarece problemele cu proba ar fi amplificate dacă este disponibilă doar o cantitate limitată de ARN. Tehnicianul ar putea avea nevoie să purifice un lot nou sau să solicite o probă proaspătă, dacă aceasta este o opțiune, pentru a determina dacă este posibil să se obțină o probă mai curată, cu o concentrație mai mare de ARN.