Wszystkie wyścigi na rowerach górskich wymagają intensywnego poziomu sprawności fizycznej i przygotowania psychicznego, ale żaden nie jest bardziej wymagający niż wyścig 24-godzinny. Wyznaczony tor wyścigowy jest przeznaczony do wyścigu 24-godzinnego, a rowerzyści górscy dążą do przejechania jak największej liczby okrążeń w ciągu 24 godzin. Oznacza to, że rowerzyści muszą jeździć na rowerach przez noc ze światłami zamontowanymi na kaskach lub kierownicy, lub na obu. 24-godzinny wyścig zwykle rozpoczyna się w południe w sobotę i kończy w południe w niedzielę, i chociaż wielu kolarzy planuje postoje na odpoczynek – od dziesięciu minut do godziny lub więcej – inni, bardziej konkurencyjni, będą jeździć non-stop przez cały 24-godzinny wyścig, nie licząc krótkich postojów na zmianę ubrania lub sprzętu.
Jednym z najbardziej wymagających aspektów 24-godzinnego wyścigu jest przygotowanie. Ponieważ rowerzysta musi zobowiązać się do jazdy na rowerze przez 24 godziny, fizyczne obciążenie ciała jest duże i dlatego potrzebuje wsparcia. Niezbędne jest mnóstwo jedzenia i wody. Organizm spali ogromne ilości kalorii i zużyje więcej wody niż organizm przyzwyczaił się do spożycia w ciągu 24 godzin, dlatego kluczowe znaczenie mają pokarmy wysokowęglowodanowe i łatwostrawne, a także obfitość wody i napojów zastępujących elektrolity.
Wyścig 24-godzinny jest również wymagający dla roweru, co w większości przypadków wymaga wsparcia ekipy lub przynajmniej gruntownej sprawności mechanicznej roweru ze strony zawodnika. Ponieważ wyścig trwa 24 godziny bez przerwy, naprawy muszą być dokonywane szybko i sprawnie, jeśli i kiedy się pojawią. Posiadanie ekipy pomocniczej pomaga kierowcy szybko i sprawnie przejść przez strefę startu i mety, dając więcej czasu na jazdę na rowerze.
W nocy jeźdźcy muszą wyposażyć się w mocne światła, aby jeździć po ciemnych szlakach. Można je zamontować na kasku lub na kierownicy roweru. Światła działają na mocnych bateriach i mają różne czasy działania, co zwykle wymaga więcej niż jednego światła. Światła na 24-godzinny wyścig różnią się wyglądem, od świateł LED po halogeny i inne rodzaje świateł.
Wyścig 24-godzinny można przeprowadzić solo z jednym zawodnikiem rywalizującym dla siebie lub jako zespół. Kategorie drużynowe różnią się w zależności od rasy, ale często są one koedukowane i wahają się od duetów do zespołów 5-osobowych. Podczas gdy jazda w zespole ułatwia oszczędzanie energii kolarzom, może również prowadzić do skurczów, gdy członkowie zespołu czekają na swoją kolej na przejechanie okrążenia, a także do zmęczenia psychicznego i osłabienia motywacji. Ten aspekt 24-godzinnego wyścigu – niezależnie od tego, czy ścigasz się solo, czy w zespole – sprawia, że wyczerpanie psychiczne jest tak samo ważnym elementem wyścigu, jak zmęczenie fizyczne.