Co to jest test wiązania dopełniacza?

Test wiązania dopełniacza to immunologiczny test medyczny, który wykrywa określone przeciwciała we krwi osoby. Test ten był kiedyś używany do diagnozowania chorób zakaźnych, ale obecnie częściej stosuje się reakcję łańcuchową polimerazy i inne metody wykrywania DNA. Wartość testu wiązania dopełniacza polega obecnie na jego zdolności do diagnozowania zaburzeń autoimmunologicznych lub monitorowania pewnych stanów przewlekłych.

Białka dopełniacza to te, które biorą udział w reakcji immunologicznej zwanej kaskadą dopełniacza. Ta reakcja zachodzi w obecności patogenów bakteryjnych i powoduje powlekanie tych patogenów białkami, które umożliwiają komórkom odpornościowym wchłanianie i niszczenie bakterii. Proces, zwany opsonizacją, wymaga obecności na powierzchni bakterii przeciwciał specyficznych dla białek. Białka w kaskadzie dopełniacza mogą również bezpośrednio zabijać przez powlekanie bakterii cząsteczkami, które powodują ich pękanie, co może wystąpić przy braku specyficznych przeciwciał.

Lekarz czasami zleca wykonanie testu wiązania dopełniacza pacjentowi, u którego występują powtarzające się infekcje. Próbka testowa to niewielka ilość krwi, zwykle pobierana z żyły ramienia, bez specjalnego przygotowania pacjenta. Po pobraniu próbki jest ona przetwarzana w celu oddzielenia płynnej surowicy od krwi, która uległa koagulacji. Następnie na surowicy przeprowadza się test wiązania dopełniacza.

Zanim będzie można przeprowadzić badanie, wymagana jest dodatkowa obróbka w celu zniszczenia własnych białek dopełniacza pacjenta. Jest to konieczne, ponieważ test wiązania dopełniacza mierzy szybkość, z jaką przeciwciała pacjenta reagują na dopełniacz, a stężenia i poziomy aktywności dopełniacza różnią się w zależności od osoby. Aby osiągnąć wystandaryzowane wyniki, dopełniacz pacjenta jest niszczony, a zamiast tego używana jest próbka dopełniacza o znanym stężeniu i poziomie aktywności.

Na tym etapie próbka dopełniacza jest gotowa do badania, a antygen będący przedmiotem zainteresowania jest dodawany do próbki testowej. Antygen jest specyficzny dla określonego gatunku patogenu lub przeciwciał autoimmunologicznych. Czerwone krwinki owiec, związane z przeciwciałami specyficznymi dla komórek, są następnie dodawane do próbki surowicy.

Jeśli próbka zawiera przeciwciała specyficzne dla badanego antygenu, przeciwciała zareagują z dodanym dopełniaczem. Spowoduje to, że cały dopełniacz w próbce zostanie zużyty i w próbce nie będzie nic, co by zareagowało z komórkami owcy; jednak, jeśli specyficzne przeciwciała nie są obecne, dopełniacz nie zostanie zużyty. W takim przypadku dopełniacz spowoduje pęknięcie czerwonych krwinek owcy, zabarwiając próbkę testową na różowo. Dlatego jeśli próbka zmieni kolor na różowy, jest to wynik ujemny, a jeśli próbka pozostaje klarowna, jest to wynik dodatni.

Dodatkowym zastosowaniem tego testu jest monitorowanie osoby, która ma znaną chorobę autoimmunologiczną. W takim przypadku testowanie poziomów aktywności dopełniacza specyficznej dla antygenu może być dobrym sposobem pomiaru skuteczności określonego leczenia. Jest to często przeprowadzane u osób z toczniem rumieniowatym układowym (SLE), chorobą autoimmunologiczną, która rozwija się, gdy układ odpornościowy organizmu reaguje na białka w jądrach komórkowych. Test wiązania dopełniacza jest również przydatny w diagnostyce infekcji ośrodkowego układu nerwowego, ponieważ nie wymaga pobrania próbki płynu mózgowo-rdzeniowego, co jest znacznie trudniejsze do uzyskania.