Test immunoenzymatyczny surowicy (ELISA) jest metodą stosowaną do określenia ilości substancji biologicznej w próbce surowicy, opierając się na specyficznej interakcji między antygenem a przeciwciałem. Przykłady substancji biologicznych będących przedmiotem zainteresowania obejmują przeciwciało wytwarzane w odpowiedzi na infekcję wirusową, takie jak przeciwciało przeciwko ludzkiemu wirusowi niedoboru odporności (HIV) lub hormon wskazujący na ciążę, taki jak ludzka gonadotropina kosmówkowa (hCG) lub autoimmunologiczna przeciwciało wytwarzane w reumatoidalnym zapaleniu stawów, takie jak czynnik reumatoidalny. Ogólnie rzecz biorąc, istnieje test bezpośredni, który wykorzystuje specyficzne przeciwciało do wykrywania obecności antygenu w próbce surowicy oraz test pośredni, który wykorzystuje antygen do określenia obecności przeciwciał w próbce surowicy.
W teście ELISA z surowicą bezpośrednią próbka zawierająca nieznaną ilość antygenu jest przyczepiana do nieruchomej powierzchni, takiej jak probówka reakcyjna lub płytka do mikromiareczkowania, i jest inkubowana ze specyficznym przeciwciałem, które jest chemicznie połączone z enzymem. Odwrotnie, w pośrednim teście ELISA surowicy, znany antygen jest przyczepiany do nieruchomej powierzchni, a następnie jest inkubowany z próbką surowicy, która zawiera nieznaną ilość przeciwciała. Oczekuje się, że przeciwciało specyficzne względem antygenu w próbce surowicy będzie ściśle wiązać się z unieruchomionym antygenem, podczas gdy przeciwciała niespecyficzne są usuwane w kolejnych etapach płukania. Ogólnie rzecz biorąc, nieruchomą powierzchnię traktuje się drugim przeciwciałem, które rozpoznaje niezmienny region wszystkich przeciwciał i które jest chemicznie połączone z enzymem. Zarówno w bezpośrednim, jak i pośrednim teście ELISA, ostatni etap polega na dodaniu substratu specyficznego dla enzymu, inicjującego reakcję, która wytwarza mierzalny sygnał, który jest wprost proporcjonalny do ilości antygenu lub przeciwciała obecnego w próbce surowicy.
Surowica ELISA jest szeroko stosowanym testem z kilku powodów. Co najważniejsze, jest uważany za wiarygodny test kliniczny ze względu na specyficzność interakcji antygen-przeciwciało, a czułość tego testu pozwala na wykrycie substancji biologicznych w skrajnie niskich stężeniach w surowicy. Jest przeznaczony do jednoczesnej oceny dużej liczby próbek, dlatego jest często stosowany w operacjach na dużą skalę, takich jak badanie przesiewowe próbek krwi dawców na obecność przeciwciał przeciwko HIV. Ponadto zestawy ELISA, które mierzą powszechnie oznaczane przeciwciała i antygeny, są dostępne w handlu do użytku w warunkach klinicznych lub badawczych i zawierają wszystkie niezbędne odczynniki do przeprowadzenia pełnego eksperymentu.
Rozwijający się obszar badań obejmuje zastosowanie technologii ELISA surowicy w obszarze wykrywania cytokin. Cytokiny to rozpuszczalne cząsteczki białka wydzielane przez układ odpornościowy, które często biorą udział w procesach zapalnych; poziomy cytokin są zatem informatywne w odniesieniu do stanów chorobowych związanych z przewlekłym stanem zapalnym, takich jak choroby serca, choroby autoimmunologiczne i choroby układu pokarmowego. Uważa się, że ocena poziomu cytokin może umożliwić rozróżnienie między chorobami zapalnymi jelit, takimi jak choroba Leśniowskiego-Crohna i wrzodziejące zapalenie jelita grubego, a ostatecznie może być w stanie przewidzieć wynik choroby serca i reumatoidalnego zapalenia stawów.