Care sunt utilizările electroforezei ADN?

Electroforeza ADN este procesul de izolare a fragmentului de ADN bazat pe atragerea acelui fragment de un pol electric. Acest proces este folosit pentru a separa fragmentele de ADN pe baza dimensiunilor lor respective printr-o atracție polară de-a lungul unui gradient electric. Acizii nucleici formează treptele unei duble helix de ADN, a cărei coloană vertebrală este formată din zaharuri dezoxiriboze și fosfați, ceea ce îi conferă o sarcină negativă. Oamenii de știință pot profita de faptul că această sarcină negativă este atrasă de un electrod pozitiv printr-un câmp electric.

Procesul de electroforeză ADN-ului este realizat prin trecerea ADN-ului pe un substrat de gel printr-un tampon electrolitic sau un substrat cum ar fi apa sărată. Un gel de agaroză care a fost înmuiat în apă sărată poate rezista la trecerea continuu a unui gradient electric prin el. Făcând multe copii ale ADN-ului, de obicei printr-un proces numit reacție în lanț a polimerazei (PCR), o anumită genă poate fi copiată exponențial dintr-o singură apariție. Genele se manifestă fizic în segmentele de ADN.

Agaroza este un substrat poros care permite trecerea moleculelor mici prin el. ADN-ul este atras de o sarcină pozitivă, astfel încât segmentele de ADN de dimensiuni diferite migrează printr-un gel de agaroză electrolitică în interiorul unui câmp electric de apă sărată. Segmentele mari migrează prin substratul de gel mai lent decât bucățile mici, astfel încât fragmentele de ADN sunt separate după dimensiune. Prin rularea unui număr mare de fragmente de ADN de aceeași dimensiune pe un gel de agaroză, proba formează o bandă groasă.

Electroforeza ADN necesită utilizarea unui substrat electrolitic, a unui câmp electric și a bromură de etidio, care este o substanță chimică foarte periculoasă. Bromura de etidio se intercalează între acizii nucleici pe o dublă helix ADN și strălucește sub o lumină ultravioletă (UV). Pentru a vizualiza o bandă de ADN pe un gel de agaroză, gelul poate fi înmuiat în bromură de etidio și fotografiat sub lumină UV. Vor fi afișate benzile formate din diferite dimensiuni ale fragmentelor de ADN, iar un experimentator poate spune dacă gena de interes – sau fragmentul de ADN – este prezentă.

De la cele mai mici organisme, cum ar fi bacteriile, până la cele mai mari organisme, cum ar fi balenele, speciile se reproduc prin copierea ADN-ului. Codul pentru crearea proteinelor necesare vieții este scris în instrucțiunile genetice furnizate de firele de ADN. Analiza ADN-ului este utilizată în multe studii științifice, inclusiv investigații penale, studii genetice pe modele animale, recombinarea bacteriană și clasificarea peptidelor. ADN-ul indică codul pentru transcripția proteinelor, astfel încât electroforeza ADN-ului este utilă în orice situație în care un om de știință sau un experimentator ar avea motive să reproducă, să separe sau să examineze genele de pe firele de ADN.