Izolarea totală a acidului ribonucleic (ARN) este o tehnică de laborator utilizată pentru a extrage tot ARN-ul celular dintr-o probă de țesut. Acest lucru diferă de alte metode de procesare care extrag selectiv anumite tipuri de ARN. Un cercetător ar putea, de exemplu, să dorească să inspecteze ARN-ul mesager (ARNm) și ar putea lucra cu o probă pentru a extrage doar acest material genetic. Există o serie de protocoale de laborator disponibile pentru izolarea totală a ARN, folosind o varietate de produse realizate de furnizori științifici.
Pot exista o serie de avantaje în colectarea întregului ARN celular dintr-o probă de țesut. Poate oferi informații mai pure și mai utilizabile. Tehnica poate permite, de asemenea, cercetătorilor să verifice degradarea care ar putea cauza probleme cu experimentele. Dacă proba este de proastă calitate, cercetătorul poate extrage din nou ARN pentru a obține o colecție mai curată și mai utilă de ARN. Acest lucru poate fi important pentru multe tipuri de cercetare, în care ARN-ul sărac la început provoacă probleme cu experimentele în continuare.
Tehnicile de izolare totală a ARN-ului pot implica o varietate de agenți chimici. Unii se concentrează pe utilizarea de substanțe chimice netoxice pentru a reduce riscul de deteriorare a probei. Astfel de substanțe chimice limitează, de asemenea, poluarea în aval a ARN și sunt mai sigure pentru lucrătorii de laborator. Laboratoarele tind să selecteze o anumită substanță chimică și un protocol pe care să le recomande întregului personal și să includă o descriere detaliată a procedurii de izolare a ARN total în manualele lor. Acest lucru asigură consecvența procesării ARN la instalație pentru a produce rezultate mai stabile și mai utile.
Procesul începe cu prepararea unei probe de țesut, care poate varia în mărime, pentru a o pregăti pentru tratament, a căror reactivi chimici vor extrage ARN-ul total. Tehnicienii consultă manualul de laborator pentru a determina cum să manipuleze proba și să o trateze pentru a izola ARN-ul. Ei pot folosi instrumente precum plăcile de electroforeză pentru a verifica calitatea probei, căutând semne de degradare care ar putea indica o problemă cu procesul total de izolare a ARN.
Cercetătorii își pot efectua propria izolare totală a ARN-ului sau pot delega această sarcină unui asistent de laborator, student absolvent sau lucrător de laborator similar. De asemenea, este posibil să contractați izolarea altor facilități de laborator. Acest lucru poate fi uneori necesar pentru a proteja integritatea unui experiment, prin utilizarea unei terțe părți pentru a genera rezultate verificabile și repetabile. În orice lucrări științifice bazate pe cercetarea cu ARN izolat, cercetătorul trebuie să discute despre metoda utilizată pentru izolare și cine a efectuat munca.