Ce este un test de schimbare a mobilității electroforetice?

Un test este un test conceput pentru a separa piesele originale ale unei celule în părți care sunt ușor de identificat. Testul de schimbare a mobilității electroforetice este un experiment care utilizează electricitatea pentru a muta macromoleculele, cum ar fi proteinele, printr-o matrice de gel pentru a provoca o separare între diferitele macromolecule în funcție de dimensiune. La fel ca o baterie de mașină, capetele negative și pozitive sunt pe părțile opuse ale testului de schimbare a mobilității electroforetice sau testului de schimbare a gelului. Acest lucru face ca electricitatea să atragă macromoleculele bazate pe sarcină. Fiecare macromoleculă se mișcă cu o viteză diferită, deoarece cele mai mici experimentează mai puține interferențe din partea gelului.

Sunt necesari mai mulți pași pentru a configura un test de schimbare a mobilității electroforetice. Macromoleculele care trebuie separate trebuie mai întâi pregătite. Cele mai multe macromolecule sunt obținute din celule vii și necesită proceduri specifice. Obținerea pieselor care trebuie separate necesită adesea o centrifugă și o reacție chimică care descompune celulele. Centrifuga va învârti o fiolă la viteză mare și va forma o granulă cu macromoleculele necesare. Acesta este dizolvat și adesea se adaugă o culoare sau o altă etichetă pentru a ajuta la urmărirea testului de schimbare a gelului.

Gelul, numit uneori pat, trebuie să fie și proaspăt făcut dintr-un amestec precis de agaroză pudră și apă care se transformă rapid din lichid în gel. De obicei, un test de schimbare a mobilității electroforetice va avea mai multe benzi pentru teste separate, care sunt utilizate pentru a compara diferite amestecuri de macromolecule. O bandă este întotdeauna setată ca control și are de obicei un singur tip de macromoleculă.

Sursa de alimentare trebuie selectată cu atenție și nu este conectată până când totul este gata. Perioada de timp în care este pornită puterea determină schimbarea mobilității macromoleculelor. Este important să separați suficient piesele pentru o analiză adecvată. Dacă puterea nu este sincronizată corespunzător, comparațiile viitoare vor fi și ele inexacte. Direcția macromoleculelor va fi determinată de sarcina pe care o au în mod natural – majoritatea se deplasează spre capătul negativ.

Testele genetice simple și analizele proteinelor sunt de obicei efectuate cu un test electroforetic de schimbare a mobilității. Acest lucru este afișat prin diferite schimburi pe benzi diferite. Dacă apare o interacțiune, macromoleculele se combină și rulează mai lent prin matrice în comparație cu banda de control cu ​​o singură macromoleculă. Testele de schimbare a gelului sunt utilizate pentru a elimina rapid sau a confirma rezultatele genetice care ar putea dura mai mult timp pentru a finaliza metodele complicate. De asemenea, ei pot determina dacă anticorpii, o macromoleculă a sistemului imunitar, se lipesc de proteinele care pot fi folosite pentru a lupta împotriva bacteriilor și virușilor.