Η ενίσχυση RNA είναι μια διαδικασία που λαμβάνει μερικά αντίγραφα ενός τμήματος ριβονουκλεϊκού οξέος (RNA) και δημιουργεί χιλιάδες αντίγραφα που είναι ίδια με τη σύνθεση. Τα κομμάτια του RNA είναι μακρομόρια, που αποτελούνται από χορδές νουκλεοτιδίων, οπότε η ενίσχυση είναι μια διαδικασία πολλών σταδίων που περιλαμβάνει την αναπαραγωγή της ακριβούς αλληλουχίας των νουκλεοτιδίων από ένα κομμάτι RNA. Η ενίσχυση RNA είναι χρήσιμη σε έρευνες που αφορούν ιούς, των οποίων το γενετικό υλικό μπορεί να αποθηκευτεί ως RNA μνήμης (mRNA) αντί για DNA. η μελέτη της γονιδιακής έκφρασης σε οργανισμούς · και τη δημιουργία πρωτεϊνών από μεταγραφικό RNA (tRNA). Για την ενίσχυση του RNA, δημιουργείται και ενισχύεται μια συμπληρωματική αλληλουχία, η οποία στη συνέχεια χρησιμοποιείται ως πρότυπο για τη δημιουργία αντιγράφων RNA. Ένας διαμεσολαβητής DNA απαιτείται για την ενίσχυση του RNA επειδή το RNA γενικά εμφανίζεται μόνο σε μονόκλωνη, μη ζευγαρωμένη μορφή, οπότε πρέπει να δημιουργηθεί ένα πρότυπο DNA για να λειτουργήσει το ένζυμο RNA μεταγραφάσης. Το RNA δεν μπορεί να μεταγραφεί από μόνο του.
Η ενδιαφέρουσα αλληλουχία RNA πρέπει πρώτα να απομονωθεί από το μολυσματικό υλικό πριν ξεκινήσει η ενίσχυση του RNA. Αφού γίνει αυτό, το ένζυμο αντίστροφη μεταγραφάση προστίθεται στο πρότυπο RNA. Η αντίστροφη μεταγραφάση χρησιμοποιείται για τη δημιουργία κυτταρικής αλληλουχίας DNA (cDNA) ζευγών βάσεων συμπληρωματικών του αρχικού mRNA. Αυτός ο πρώτος κλώνος cDNA μπορεί στη συνέχεια να χρησιμοποιηθεί για τη δημιουργία δεύτερων κλώνων cDNA που μπορούν να χρησιμοποιηθούν στην αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, μια διαδικασία που ενισχύει τους κλώνους DNA μέσω επαναλαμβανόμενων κύκλων αντιγραφής DNA και επακόλουθου διαχωρισμού των δύο κλώνων. Το cDNA συνήθως περιέχει εκκινητές ή ένζυμα στο ένα άκρο της αλληλουχίας DNA, που χρησιμεύουν ως σήματα για τη σύνδεση νουκλεοτιδίων, και έτσι, την παραγωγή κλώνων mRNA που είναι πανομοιότυπες με την αρχική αλληλουχία.
Υπάρχουν αρκετές μέθοδοι για ενίσχυση RNA, αλλά η μέθοδος που αποδίδει τη μεγαλύτερη ποσότητα mRNA που είναι πιστή στο αρχικό αντίγραφο ονομάζεται μέθοδος εναλλαγής προτύπου. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί το ένζυμο αντίστροφης μεταγραφάσης από τον ιό λευχαιμίας ποντικού Moloney, το οποίο προσθέτει μια περιοχή εκκινητή στο τέλος του cDNA πρώτου κλώνου μετά τη δημιουργία αυτού του κλώνου από το πρότυπο RNA. Αυτή η περιοχή εκκινητή προστίθεται επίσης στη δεύτερη αλυσίδα του cDNA, από την οποία γίνονται ενισχυμένα αντίγραφα RNA. Ένα άλλο ένζυμο, που ονομάζεται προαγωγέας, μπορεί να συνδεθεί στην περιοχή εκκινητή στο δεύτερο σκέλος του cDNA, το οποίο αυξάνει δραστικά την ποσότητα αντιγράφων RNA που παράγονται από αυτόν τον κλώνο cDNA μέσω μεταγραφής.