Test antybiogramu może być używany do dwóch różnych celów. Metoda Kirby-Bauera służy do badania wrażliwości szczepu bakteryjnego na różne antybiotyki. Antybiogramy mogą również określać minimalne stężenie hamujące (MIC) lub najmniejsze stężenie antybiotyku, które będzie hamować wzrost szczepu bakteryjnego, stosując metodę rozcieńczania.
Metoda Kirby-Bauera to antybiogram używany do określenia najlepszego antybiotyku do zastosowania przeciwko danemu szczepowi bakterii. Testy przeprowadza się na płytkach Petriego, które są płytkimi, okrągłymi, przykrytymi szalkami wypełnionymi podłożem agarowym lub substancją podobną do żelu, nasączoną składnikami odżywczymi w celu pobudzenia wzrostu bakterii. Badany szczep bakterii jest równomiernie rozprowadzany na powierzchni płytki. Kilka okrągłych papierowych krążków, z których każdy jest nasączony innym antybiotykiem, jest równomiernie rozmieszczonych na powierzchni płytki i delikatnie wciskanych w agar, aby nawiązać kontakt z bakteriami. Płytki następnie pozostawia się do wzrostu przez noc w inkubatorze.
Po całonocnej inkubacji każdy krążek bibuły zostanie otoczony okrągłym obszarem pozbawionym wzrostu bakterii. Ten obszar nazywany jest strefą zahamowania. Mierzy się średnicę strefy zahamowania dla każdego krążka i porównuje z kartą kontrolną w celu określenia, czy testowany szczep bakterii jest oporny, pośredni lub wrażliwy na każdy z różnych antybiotyków. Duża strefa zahamowania oznaczałaby, że szczep bakterii jest podatny na działanie antybiotyku na krążku testowym.
Metoda rozcieńczania jest antybiogramem używanym do określenia najskuteczniejszego stężenia antybiotyku do zastosowania przeciwko szczepowi bakterii. Rozpoczyna się od wyhodowania lub wyhodowania świeżej partii bakterii testowej przez noc, a następnie sprawdzenia nowych kultur pod kątem czystości lub oczyszczenia kultury. Przygotowuje się również dwie bakterie kontrolne lub porównawcze. Stężenie szczepu bakteryjnego określa się za pomocą spektrofotometru, a stężenie dostosowuje się do zakresu odpowiedniego dla metody rozcieńczenia.
Seryjne rozcieńczenie testowanych antybiotyków jest przygotowywane poprzez narastające i stopniowane zmiany stężenia w różnych fiolkach. Jedną serię o różnych stężeniach antybiotyku zaszczepia się równymi ilościami badanego szczepu bakteryjnego, a drugą serię zaszczepia się kontrolnymi szczepami bakteryjnymi. Wszystkim zaszczepionym stężeniom antybiotyków pozwala się na wzrost przez noc w inkubatorze lub do zaobserwowania widocznego wzrostu bakterii w niektórych fiolkach. MIC to stężenie antybiotyku, przy którym nie obserwuje się widocznego wzrostu bakterii. Wartość MIC jest kontrolowanym sposobem oceny zmieniającej się oporności szczepów bakteryjnych i wyznacza granice antybiotykoterapii w przypadku infekcji.