Τι είναι η συγκέντρωση RNA;

Η συγκέντρωση του ριβονουκλεϊκού οξέος (RNA) είναι μια μέτρηση του πόσο από αυτό το γενετικό υλικό υπάρχει σε ένα δείγμα. Αυτό το νουκλεϊκό οξύ είναι ένα από τα σημαντικά δομικά στοιχεία της ζωής, κρίσιμης σημασίας για τη λειτουργία των οργανισμών από τις φάλαινες μέχρι τις γάτες του σπιτιού. Μπορεί να αναλυθεί σε δοκιμές για διάφορους λόγους, συμπεριλαμβανομένων διαγνωστικών σκοπών, έρευνας και ιατροδικαστικής ανάλυσης. Προτού μπορέσει να δοκιμαστεί, πρέπει να υποβληθεί σε προσεκτική επεξεργασία και έλεγχος για να επιβεβαιωθεί ότι το δείγμα είναι καλής ακεραιότητας και θα αποφέρει ακριβή αποτελέσματα.

Κατά την επεξεργασία, οι τεχνικοί εξάγουν RNA από ένα δείγμα ώστε να μπορούν να το αναλύσουν. Αυτό μπορεί να περιλαμβάνει θεραπεία με ένζυμα που αφαιρούν το δεοξυριβονουκλεϊκό οξύ (DNA) και πρωτεΐνες που μπορεί να υπάρχουν στο δείγμα. Απαιτούνται προσεκτικοί έλεγχοι για να περιοριστούν οι πιθανότητες μόλυνσης και να διατηρηθεί όσο το δυνατόν περισσότερο RNA. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν εξειδικευμένα γυάλινα σκεύη και εργαστηριακά πλαστικά για αυτή τη διαδικασία και οι τεχνικοί ακολουθούν επίσης μια τυπική εργαστηριακή διαδικασία για συνέπεια.

Η κλασική προσέγγιση για τη μέτρηση της συγκέντρωσης RNA περιλαμβάνει τη διεξαγωγή δείγματος μέσω ενός φασματοφωτόμετρου, μιας συσκευής που μετρά την απορρόφηση φωτός. Οι μετρήσεις μπορούν να παρέχουν πληροφορίες σχετικά με το πόσο RNA υπάρχει με βάση το πόσο φως σε συγκεκριμένα μήκη κύματος απορροφάται. Αυτό μπορεί επίσης να υποδεικνύει εάν υπάρχουν μολυντές σε ένα δείγμα, επειδή άλλα υλικά απορροφούν φως σε διαφορετικά μήκη κύματος. Έτσι, το τεστ μπορεί να εκτελέσει μια διπλή λειτουργία ποσοτικοποιώντας το RNA και αξιολογώντας το για μόλυνση.

Μια άλλη επιλογή είναι να προσθέσετε μια βαφή στο δείγμα και να την εκθέσετε στο φως για να δείτε εάν η βαφή φθορίζει και πόσο έντονα. Οι βαφές μπορούν να συνδεθούν στενά με τα νουκλεϊκά οξέα για να παρέχουν πληροφορίες σχετικά με τις συγκεντρώσεις τους. Ένα μειονέκτημα αυτής της μεθόδου είναι ότι οι τιμές συγκέντρωσης RNA μπορεί να είναι απενεργοποιημένες εάν το δείγμα περιέχει επίσης DNA ή άλλες ακαθαρσίες, καθώς η χρωστική μπορεί να συνδεθεί και σε αυτές. Οι τεχνικοί μπορούν να χρησιμοποιήσουν αυτήν την επιλογή για να προσδιορίσουν τη συγκέντρωση RNA μόνο εάν είναι βέβαιοι ότι το δείγμα είναι πολύ καθαρό για να αποφευχθεί η λήψη ψευδών αποτελεσμάτων.

Εάν η συγκέντρωση RNA είναι πολύ χαμηλή, το δείγμα ενδέχεται να μην μπορεί να χρησιμοποιηθεί. Ενδέχεται να μην είναι αρκετό για να εκτελέσετε δοκιμές και να ελέγξετε ξανά τα αποτελέσματα, για παράδειγμα. Μια αυξημένη πιθανότητα σφάλματος μπορεί επίσης να είναι ανησυχητική, επειδή τα προβλήματα με το δείγμα θα μεγεθύνονταν εάν είναι διαθέσιμη μόνο μια περιορισμένη ποσότητα RNA. Ο τεχνικός μπορεί να χρειαστεί να καθαρίσει μια νέα παρτίδα ή να ζητήσει ένα νέο δείγμα, εάν αυτό είναι μια επιλογή, για να προσδιορίσει εάν είναι δυνατό να ληφθεί ένα καθαρότερο δείγμα με υψηλότερη συγκέντρωση RNA.