Τι είναι ένα αντίσωμα IHC;

Ένα ανοσοϊστοχημικό (IHC) αντίσωμα είναι ένα αντιδραστήριο που χρησιμοποιείται συνήθως σε επιστημονικές μελέτες για την επισήμανση των αντιγόνων που μας ενδιαφέρουν. Ένα αντιγόνο είναι οποιοδήποτε μικρό μόριο που μπορεί να προκαλέσει μια ανοσολογική αντίδραση που αναγκάζει την παραγωγή αντισωμάτων εναντίον αυτού του μοναδικού αντιγόνου. Με βάση το ανοσοποιητικό σύστημα των θηλαστικών, η παραγωγή αντισωμάτων είναι ένα μόνο βήμα σε μια διαδικασία αναγνώρισης υλικού ως ξένου, έτσι ώστε το σώμα να μπορεί στη συνέχεια να επιτεθεί και να αποβάλει την εισβάλλουσα ουσία, είτε πρόκειται για ιό, βακτηριακή λοίμωξη ή μικρό μόριο όπως η γύρη.

Τα αντισώματα μπορεί να έχουν τεράστια ειδικότητα και ικανότητα δέσμευσης στην επισήμανση αντιγόνων. Αυτή η εξειδίκευση αξιοποιείται προς όφελος των επιστημόνων όταν η παραγωγή αντισωμάτων προσανατολίζεται προς την ταυτοποίηση συγκεκριμένων αντιγόνων που ενδιαφέρουν. Ένα λεπτό τμήμα ιστού μπορεί να χρωματιστεί με ένα αντίσωμα, έτσι ώστε ο πειραματιστής να μπορεί εύκολα να αναγνωρίσει όλες τις θέσεις αντιγόνου που υπάρχουν σε αυτό το δείγμα. Πολλές εταιρείες ειδικεύονται στη δημιουργία αντισωμάτων, με αποτέλεσμα ένας τεράστιος συλλογικός κατάλογος αντισωμάτων να είναι διαθέσιμος σε επιστήμονες και πειραματιστές.

Ένα αντίσωμα IHC χρησιμοποιείται σε διαφορετικές πειραματικές τεχνικές. Συχνά χρησιμοποιείται χρώση αντισωμάτων σε λεπτές τομές ιστού που είναι ενσωματωμένοι σε παραφίνη ή πλαστικό, έτσι ώστε να μπορούν να βρεθούν αντιγόνα in situ. Ένα αντίσωμα IHC μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί σε πειραματικές τεχνικές κατακρήμνισης, όπως μια δοκιμασία συν-ανοσοκαθίζησης, εστιάζοντας στην εξαγωγή αντιγόνων από το διάλυμα για να ποσοτικοποιηθεί η ποσότητα του αντιγόνου που υπάρχει σε ένα μεγάλο κομμάτι ιστού. Δοκιμασίες που μετρούν την ποσότητα φωτός που μπορεί να περάσει καλά από μια πλάκα καλλιέργειας ιστού αφού ένα υπερκείμενο έχει εκτεθεί στον πυθμένα ενός καλά επικαλυμμένου αντισώματος IHC χρησιμοποιούνται επίσης συχνά για την ποσοτικοποίηση της ποσότητας ενός αντιγόνου σε ένα ομογενοποιημένο δείγμα ιστού.

Είναι πιθανό να υπάρχουν πρωτόκολλα χρώσης αντισωμάτων που να βασίζονται στη χρήση ενός μόνο αντισώματος για την ανίχνευση αντιγόνου. Αυτά τα πρωτόκολλα συνήθως χρησιμοποιούνται σε δείγματα ιστού που είναι ενσωματωμένα σε μη αντιδραστικό υπόστρωμα και τοποθετημένα σε γυάλινη πλάκα. Αυτές οι διαδικασίες χρώσης ενός αντισώματος είναι επίσης δημοφιλείς σε εργαστήρια που επισημαίνουν τα δικά τους αντισώματα με μόρια ανίχνευσης όπως φθοροφόρα.

Συνηθέστερα, ωστόσο, τα πρωτόκολλα χρώσης αντισωμάτων απαιτούν τη χρήση πρωτογενών και δευτερογενών αντισωμάτων. Ένα πρωτογενές αντίσωμα IHC εγείρεται έναντι ενός συγκεκριμένου αντιγόνου, το οποίο μπορεί να μελετηθεί ασυνήθιστα. Ένα δευτερεύον αντίσωμα IHC θα εγερθεί έναντι του πρωτογενούς αντισώματος IHC. Το δευτερεύον αντίσωμα θα επισημανθεί, ωστόσο, σε ένα ταυτοποιητικό μόριο όπως η βιοτίνη ή ένα φθοροφόρο. Αυτή η τεχνική δύο αντισωμάτων είναι συνηθισμένη επειδή οι εταιρείες εξοικονομούν χρήματα προσθέτοντας φθοροφόρα ή ακριβά αντιδραστήρια σήμανσης σε μεγάλες ποσότητες αντισωμάτων που δημιουργούνται ενάντια στους ανοσολογικούς δείκτες ενός συγκεκριμένου είδους αντί για την επισήμανση ακριβών αντιδραστηρίων σε ένα αντίσωμα που δημιουργείται ενάντια σε ένα αντιγόνο που μπορεί να μελετηθεί από πολύ λίγους Επιστήμονες.