Τι είναι η ανίχνευση αντισωμάτων;

Η ανίχνευση αντισωμάτων είναι σημαντική στην ιατρική για την ανίχνευση ασθενειών, καθώς τα αντισώματα είναι μεγάλες πρωτεΐνες που μπορούν να ανιχνεύσουν ιούς και βακτήρια. Η ανίχνευση αντισωμάτων πραγματοποιείται σε εργαστήρια και στο πεδίο για να εξεταστούν οι δεσμοί αντισώματος και αντιγόνου και να αναγνωριστεί ένα αντίσωμα από την ιδιαίτερη αλλαγή χρώματός του όταν ένα μόριο υποστρώματος που αντιδρά ένζυμο συνδέεται με αυτό ενώ είναι ακόμα συνδεδεμένο με το αντιγόνο. Η δοκιμή ανίχνευσης είναι γνωστή ως ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA). Πριν από την ανάπτυξη της ELISA, οι μόνες αναλύσεις ήταν οι ραδιοανοσοδοκιμασίες που εντόπισαν τα αντισώματα με βάση την ειδική ραδιενέργεια τους τη δεκαετία του 1960. Στις αρχές της δεκαετίας του 1970 αναπτύχθηκαν διάφορες τεχνικές ELISA για τον εντοπισμό συγκεκριμένων αντισωμάτων.

Η τεχνική ανίχνευσης αντισωμάτων Indirect Sandwich ELISA παρασκευάζει ένα ρυθμιστικό διάλυμα που περιέχει ένα αντιγόνο ασθένειας και το δεσμεύει σε μια πλαστική πλάκα. Στη συνέχεια, ένα πρωτογενές αντίσωμα από έναν ασθενή εισάγεται για να συνδεθεί με το αντιγόνο. Στη συνέχεια, εισάγεται ένα δευτερεύον αντίσωμα με προσκολλημένο ένζυμο και προστίθεται ένα υπόστρωμα για το ένζυμο. Αυτό προκαλεί μια αντίδραση που αλλάζει το χρώμα του ενζύμου, σηματοδοτώντας ότι τα δύο αντισώματα έχουν συνδεθεί, εάν το αντίσωμα από τον ασθενή είναι θετικό για αυτό το αντιγόνο της νόσου. Η ισχύς της αλλαγής χρώματος υποδηλώνει την ποσότητα της ασθένειας που έχει ανιχνεύσει το αντίσωμα. Αυτή η ισχύς του χρώματος στη συνέχεια μετράται ποσοτικά με ένα φασματόμετρο.

Μια άλλη τεχνική ELISA καλή όταν τα δείγματα από ασθενείς είναι ακατέργαστα ή ακάθαρτα είναι η Competitive ELISA, όταν ένα μη επισημασμένο αντίσωμα επωάζεται με το δείγμα αντιγόνου του ασθενούς. Το σύμπλοκο δεσμευμένου αντισώματος/αντιγόνου πλένεται έτσι ώστε το μη δεσμευμένο αντίσωμα να αφαιρεθεί και ένα δευτερεύον αντίσωμα συζευγμένο με ένα ένζυμο ειδικό για το πρωτεύον αντίσωμα εισάγεται για να συνδεθεί με το αντιγόνο. Με την προσθήκη ενός υποστρώματος στο ένζυμο, εάν η ασθένεια ανιχνευθεί από το αντίσωμα, το ένζυμο θα παράγει χρωμογόνες ή φθορίζουσες ιδιότητες ως σήμα. Μια δοκιμή πεδίου που χρησιμοποιήθηκε από Ισραηλινούς γιατρούς χρησιμοποιεί έναν δοκιμαστικό σωλήνα γεμάτο θραύσματα πρωτεΐνης και αντισώματα και την εισαγωγή ενός μπλε υγρού. Εάν το μπλε υγρό γίνει κόκκινο μέσα σε δέκα λεπτά, το συγκεκριμένο αντιγόνο στον δοκιμαστικό σωλήνα αναγνωρίζεται από το αντίσωμα για τη συγκεκριμένη ασθένεια.

Σε δυσπρόσιτες περιοχές των αναπτυσσόμενων χωρών, τα εργαστήρια δεν είναι εύκολα προσβάσιμα. Πολλά εμπορικά κιτ ανίχνευσης αντισωμάτων έχουν πουληθεί σε επαγγελματίες υγείας για έλεγχο φυματίωσης, ιδιαίτερα φυματίωσης που σχετίζεται με τον ιό της παιδικής και ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας/σύνδρομο αυτοάνοσης ανεπάρκειας (HIV/AIDS). Μια μελέτη που περιελάμβανε 68 συγκεκριμένες μελέτες διαπίστωσε ότι αυτά τα κιτ δεν ήταν τόσο αξιόπιστα όσο η μικροσκοπία επιχρίσματος πτυέλων.

Η ελονοσία είναι μια άλλη ασθένεια για την οποία η ανίχνευση αντισωμάτων χρησιμοποιεί μια διαδικασία δοκιμής αντισωμάτων φθορισμού. Αυτή η διαδικασία είναι καλή για τον έλεγχο αιμοδοτών καθώς η ελονοσία που προκαλείται από μετάγγιση μπορεί να μην εμφανιστεί σε μια απλή εξέταση μεμβράνης αίματος. Εάν ένας ασθενής εμφανίζει επανειλημμένα αρνητικά δείγματα αίματος, αλλά εμφανίζει ισχυρή συμπτωματολογία της νόσου, το τεστ φθορισμού δείκτη μπορεί να το αποκαλύψει. Όταν εξετάζονται στο μικροσκόπιο, τα αντισώματα για την ελονοσία συχνά εμφανίζουν ένα πράσινο-μήλο χρώμα που είναι θετικό για το παράσιτο της ελονοσίας.