Procedura ELISA începe în clinică, cu o probă de sânge prelevată de la pacient. Apoi sunt urmați o serie de pași folosind trusa de testare ELISA în laborator. Testul va detecta prezența anticorpilor sau antigenelor unei boli, cum ar fi HIV, în sânge. Pașii includ adăugarea diferitelor substanțe și spălarea, iar rezultatele sunt în general măsurate printr-o schimbare de culoare.
Testul imunosorbent legat de enzime (ELISA), care este denumit și imunotestul enzimatic (EIA), este utilizat ca test de diagnostic. Este cel mai bine cunoscut ca test de diagnostic pentru HIV. Placa de testare constă de obicei din 96 de godeuri mici în care este imobilizat un antigen specific. Dacă anticorpul este prezent în proba de ser, acesta se va lega de antigen, permițând detectarea prin diferitele etape ale procedurii ELISA.
Primul pas în procedura ELISA este obținerea unei probe de la pacient. Aceasta se face de o asistentă medicală, în condiții sterile. De obicei, sângele este luat dintr-o venă a brațului sau a mâinii. Se pune un garou pe brat pentru a umfla vena si a face procedura mai usoara si se curata pielea de unde va fi introdus acul. O mică înțepătură poate fi simțită pe măsură ce acul intră și sângele va fi colectat într-un tub steril.
După prelevarea probei de sânge, aceasta este transferată în laborator, unde restul procedurii ELISA va fi efectuată de un tehnician de laborator. Proba de sânge este adăugată mai întâi în godeurile plăcii ELISA. Dacă anticorpul specific este prezent, acesta se leagă de antigen. Placa este apoi spălată, folosind un tampon, pentru a îndepărta anticorpii nelegați.
Se adaugă apoi un al doilea anticorp, în mod normal de origine animală, care are o enzimă care este atașată la acesta, care se va lega de complexul anticorp-antigen. Farfuria se spală din nou, pentru a elimina excesul. Enzima este reactivă la culoare atunci când se adaugă un substrat la sfârșitul procedurii ELISA. Este măsurarea gradului de schimbare a culorii care dă rezultatul.
Procedura ELISA trebuie urmată cu atenție pentru a evita rezultatele false. În majoritatea plăcilor ELISA este inclus un control pozitiv și negativ, pentru a minimiza astfel de rezultate false. La testarea HIV, un rezultat pozitiv va fi de obicei urmat de un al doilea test de confirmare, adesea de alt tip, cum ar fi Western Blot.