Τι είναι η ELISA ορού;

Η ανοσοπροσροφητική δοκιμασία συνδεδεμένη με ένζυμο ορού (ορός ELISA) είναι μια μέθοδος που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της ποσότητας μιας βιολογικής ουσίας σε ένα δείγμα ορού με βάση την ειδική αλληλεπίδραση μεταξύ ενός αντιγόνου και ενός αντισώματος. Παραδείγματα βιολογικών ουσιών που ενδιαφέρουν περιλαμβάνουν ένα αντίσωμα που παράγεται ως απόκριση σε μια ιογενή λοίμωξη, όπως ένα αντίσωμα κατά του ιού της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας (HIV) ή σε μια ορμόνη που υποδηλώνει εγκυμοσύνη, όπως η ανθρώπινη χοριακή γοναδοτροπίνη (hCG) ή σε ένα αυτοάνοσο αντίσωμα που παράγεται στη ρευματοειδή αρθρίτιδα, όπως ο ρευματοειδής παράγοντας. Γενικά, υπάρχει ένας άμεσος προσδιορισμός, ο οποίος χρησιμοποιεί ένα ειδικό αντίσωμα για την ανίχνευση της παρουσίας αντιγόνου σε ένα δείγμα ορού και ένας έμμεσος προσδιορισμός, ο οποίος χρησιμοποιεί ένα αντιγόνο για τον προσδιορισμό της παρουσίας αντισωμάτων σε ένα δείγμα ορού.

Στην άμεση ELISA ορού, ένα δείγμα που περιέχει μια άγνωστη ποσότητα αντιγόνου συνδέεται σε μια ακίνητη επιφάνεια, όπως ένα σωλήνα αντίδρασης ή μια πλάκα μικροτιτλοδότησης, και επωάζεται με ένα ειδικό αντίσωμα που είναι χημικά συνδεδεμένο με ένα ένζυμο. Αντίθετα, στην έμμεση ELISA ορού, ένα γνωστό αντιγόνο προσκολλάται σε μια ακίνητη επιφάνεια και στη συνέχεια επωάζεται με το δείγμα ορού που περιέχει άγνωστη ποσότητα αντισώματος. Το ειδικό για το αντιγόνο αντίσωμα στο δείγμα ορού αναμένεται να συνδεθεί στενά με το ακινητοποιημένο αντιγόνο, ενώ τα μη ειδικά αντισώματα αφαιρούνται στα ακόλουθα βήματα πλύσης. Γενικά, η ακίνητη επιφάνεια επεξεργάζεται με ένα δεύτερο αντίσωμα που αναγνωρίζει την αμετάβλητη περιοχή όλων των αντισωμάτων και το οποίο συνδέεται χημικά με ένα ένζυμο. Τόσο στην άμεση όσο και στην έμμεση ELISA, το τελικό βήμα συνίσταται στην προσθήκη ενός ενζυμοειδούς υποστρώματος, ξεκινώντας μια αντίδραση που παράγει ένα μετρήσιμο σήμα που είναι ευθέως ανάλογο με την ποσότητα του αντιγόνου ή του αντισώματος που υπάρχει στο δείγμα ορού.

Η ELISA ορού είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη εξέταση για διάφορους λόγους. Το πιο σημαντικό, θεωρείται ένα αξιόπιστο κλινικό τεστ λόγω της ειδικότητας της αλληλεπίδρασης αντιγόνου-αντισώματος και η ευαισθησία αυτής της ανάλυσης επιτρέπει την ανίχνευση βιολογικών ουσιών σε εξαιρετικά χαμηλές συγκεντρώσεις στον ορό. Έχει σχεδιαστεί για την αξιολόγηση μεγάλου αριθμού δειγμάτων ταυτόχρονα, και γι’ αυτό χρησιμοποιείται συχνά σε εγχειρήσεις μεγάλης κλίμακας, όπως ο έλεγχος δειγμάτων αιμοδοτών για την παρουσία αντισωμάτων HIV. Επιπλέον, τα κιτ ELISA που μετρούν τα κοινά δοκιμαζόμενα αντισώματα και αντιγόνα είναι εμπορικά διαθέσιμα για χρήση σε κλινικά ή ερευνητικά περιβάλλοντα και περιέχουν βολικά όλα τα απαραίτητα αντιδραστήρια για τη διεξαγωγή ενός πλήρους πειράματος.

Ένας αυξανόμενος τομέας μελέτης περιλαμβάνει την εφαρμογή της τεχνολογίας ELISA ορού στον τομέα της ανίχνευσης κυτοκινών. Οι κυτοκίνες είναι διαλυτά μόρια πρωτεΐνης που εκκρίνονται από το ανοσοποιητικό σύστημα και συχνά εμπλέκονται σε φλεγμονώδεις διεργασίες. Τα επίπεδα κυτοκίνης είναι επομένως ενημερωτικά σχετικά με καταστάσεις ασθενειών που σχετίζονται με χρόνια φλεγμονή, όπως καρδιακές παθήσεις, αυτοάνοσα νοσήματα και πεπτικές παθήσεις. Θεωρείται ότι η αξιολόγηση των επιπέδων κυτοκίνης μπορεί να είναι σε θέση να διακρίνει μεταξύ φλεγμονωδών ασθενειών του εντέρου, όπως η νόσος του Crohn και η ελκώδης κολίτιδα, και μπορεί τελικά να είναι σε θέση να προβλέψει την έκβαση σε καρδιακές παθήσεις και ρευματοειδή αρθρίτιδα.