Czym jest kultura ilościowa?

Kultura ilościowa to termin należący do dziedziny mikrobiologii. Opisuje różne techniki stosowane przez mikrobiologów do zliczania liczby drobnoustrojów obecnych w określonej próbce. Niektóre techniki analityczne identyfikują tylko obecność określonych mikroorganizmów, a nie ilość obecnych mikroorganizmów, a zatem metody te nie są ilościowe.

Kiedy mikrobiolog dostarcza drobnoustrojom wystarczającą ilość składników odżywczych do wzrostu i namnażania, proces ten nazywa się hodowlą. Mikroby są bardzo małe i mogą być obecne w próbkach w dużych ilościach. Dla mikrobiologa praktycznie niemożliwe jest, aby wiedzieć, co znajduje się w próbce iw jakich stężeniach, bez umożliwienia rozwoju mikroorganizmów do poziomu łatwego do odczytania.

Próbki mikrobiologiczne mogą zawierać wszystko, co może zawierać drobnoustroje. Przykłady obejmują żywność, krew lub wodę. Niektóre z tych próbek najczęściej zawierają dużo drobnoustrojów, takich jak mięso mielone, lub mają niewiele lub nie mają drobnoustrojów, jak krew. Zadaniem analityka jest umieszczenie próbki w pożywce hodowlanej, która może wykazać, ile pojedynczych drobnoustrojów jest obecnych.

Analityk zazwyczaj usuwa określoną miarę próbki, na przykład 1 ml wody. Ma to na celu sprawdzenie, ile drobnoustrojów znajduje się w tym ml, a tym samym obliczyć, ile drobnoustrojów jest obecnych w próbce jako całości lub w źródle próbki. Jeśli uważa, że ​​całkowita liczba drobnoustrojów w tym ml próbki będzie wysoka, analityk dokonuje rozcieńczenia do punktu, w którym wynik będzie na poziomach, które nie są zbyt wysokie, aby je odczytać.

Jedna metoda hodowli ilościowej polega na wymieszaniu XNUMX ml próbki lub rozcieńczenia ze składnikami odżywczymi w stałym podłożu. Następnie analityk inkubuje to w określonej temperaturze i czasie, aby pomóc drobnoustrojom się rozmnażać. Z każdego początkowego drobnoustroju obecnego w próbce, który może rosnąć w tych warunkach, na podłożu znajduje się jedna widoczna plamka wielu komórek drobnoustrojów, zwana kolonią. Analityk po prostu je zlicza i, jeśli to konieczne, mnoży tę liczbę przez rozcieńczenia, aby dowiedzieć się, ile drobnoustrojów znajduje się w początkowym ml próbki.

Wiedza o tym, ile drobnoustrojów jest obecnych w próbce, uzyskana dzięki kulturze ilościowej, jest użytecznym wskaźnikiem czystości próbki. Na przykład mocz zdrowych ludzi nie powinien mieć żadnego skażenia mikrobiologicznego, a wyższy poziom skażenia wskazuje na intensywność infekcji. Dzięki kulturze ilościowej mikrobiolog może nie tylko dowiedzieć się, ile drobnoustrojów znajduje się w próbce, ale także ile poszczególnych gatunków. Aby to zrobić, musi zmieszać próbkę ze specjalną pożywką, na której rosną tylko niektóre rodzaje drobnoustrojów, zamiast z ogólną pożywką, która pozwala na rozwój wielu drobnoustrojów.
Niektóre techniki mikrobiologiczne umożliwiają rozwój istniejących drobnoustrojów przed badaniem ich obecności. Wraz ze wzrostem początkowej ilości mikroorganizmów w próbce ich liczba rośnie. Te metody analizy mikrobiologicznej, chociaż mogą pomóc w identyfikacji obecności określonych drobnoustrojów w próbce, nie są w stanie dokładnie policzyć poziomu drobnoustrojów i nie są częścią hodowli ilościowej.