Η νικοτίνη μπορεί να ανιχνευθεί μέσω διαφόρων δοκιμών που μετρούν το επίπεδο μιας χημικής ουσίας που ονομάζεται κοτινίνη. Το σώμα παράγει κοτινίνη μόνο όταν η νικοτίνη εισέρχεται στο σώμα, όπως μέσω της χρήσης τσιγάρων, καπνού για πίπες, ταμπάκου, πούρων ή καπνού για μάσημα. Η κοτινίνη μπορεί να ανιχνευθεί με εξέταση του αίματος, των μαλλιών, του σάλιου ή των ούρων ενός ατόμου. Τα αποτελέσματα των δοκιμών μπορούν να δείξουν εάν ένα άτομο είναι τρέχων χρήστης καπνού ή πρώην χρήστης.
Υπάρχουν διάφοροι λόγοι για τους οποίους μπορεί να γίνει δοκιμή νικοτίνης. Οι γονείς μερικές φορές χρησιμοποιούν τα τεστ για να προσδιορίσουν εάν τα παιδιά τους κάπνιζαν. Οι πάροχοι ασφάλισης υγείας ορισμένων εταιρειών απαιτούν τεστ νικοτίνης για την αξιολόγηση των κινδύνων για την υγεία ενός δυνητικού υπαλλήλου. Ο έλεγχος μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί σε προγράμματα διακοπής του καπνίσματος, σε περιπτώσεις επιμέλειας παιδιών, όταν ένα άτομο υποβάλλει αίτηση για ασφάλιση ζωής ή για ερευνητικούς σκοπούς.
Η εξέταση ούρων είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη μέθοδος για τη δοκιμή νικοτίνης. Το επίπεδο της κοτινίνης στα ούρα μετράται χρησιμοποιώντας μια δοκιμαστική ταινία ή τοποθετώντας μερικές σταγόνες ούρων σε έναν δοκιμαστικό δίσκο. Τα ούρα που περιέχουν κοτινίνη αντιδρούν με τα υλικά δοκιμής για να δείξουν θετικό ή αρνητικό αποτέλεσμα. Τα οικιακά κιτ δοκιμών φαρμάκων είναι άμεσα διαθέσιμα στα φαρμακεία ή μέσω του Διαδικτύου για όσους θέλουν να κάνουν ιδιωτικά τεστ νικοτίνης. Η εξέταση ούρων νικοτίνης ισχύει για περίπου τέσσερις ημέρες μετά την τελευταία χρήση καπνού από ένα άτομο.
Η αξιολόγηση του σάλιου για έλεγχο νικοτίνης είναι μια διαδικασία παρόμοια με την εξέταση ούρων. Για αυτήν την αξιολόγηση, ένα δείγμα σάλιου τοποθετείται σε μια δοκιμαστική ταινία και παράγει αποτελέσματα σε περίπου μισή ώρα. Αν και η δοκιμή σάλιου νικοτίνης δίνει σταθερά και ακριβή αποτελέσματα, μπορεί να δείξει θετική ένδειξη από την έκθεση στο παθητικό κάπνισμα. Οι γονείς μερικές φορές χρησιμοποιούν κιτ οικιακών τεστ σάλιου για να προσδιορίσουν εάν τα παιδιά τους κάπνιζαν.
Η ανάλυση αίματος για τη δοκιμή νικοτίνης δεν είναι τόσο αξιόπιστη όσο οι εξετάσεις ούρων ή σάλιου. Όταν ένα άτομο χρησιμοποιεί καπνό, το επίπεδο της νικοτίνης στο αίμα αυξάνεται σχεδόν αμέσως και παραμένει παρόν για περισσότερο από δύο εβδομάδες. Το επίπεδο νικοτίνης που εμφανίζεται στο αίμα μπορεί να ποικίλλει ανάλογα με τον μεταβολισμό του ατόμου, τον τύπο του καπνού που χρησιμοποιείται και πόσο βαθιά εισπνέεται ο καπνός. Ορισμένοι εργοδότες προτιμούν την αξιολόγηση αίματος επειδή μπορούν να ελέγχουν για νικοτίνη και παράνομα ναρκωτικά ταυτόχρονα.
Η κοτινίνη μπορεί να παραμείνει στους θύλακες των τριχών για έως και ένα χρόνο αφού ένα άτομο σταματήσει να χρησιμοποιεί καπνό. Η δοκιμή νικοτίνης με δείγματα μαλλιών είναι δαπανηρή και σπάνια χρησιμοποιείται από ασφαλιστικές εταιρείες ή εργοδότες. Γενικά περιορίζεται στην έρευνα που μετρά τις επιπτώσεις του παθητικού καπνίσματος στους μη καπνιστές. Οι τρίχες από οποιοδήποτε μέρος του σώματος είναι κατάλληλες για αυτό το είδος δοκιμής.