Υπήρχαν τέσσερις κύριες γλώσσες που μιλούσαν οι άνθρωποι στους Βιβλικούς χρόνους: Λατινικά, Ελληνικά, Αραμαϊκά και Εβραϊκά. Η Παλαιά Διαθήκη της Βίβλου γράφτηκε αρχικά στα αραμαϊκά και τα εβραϊκά, και η Καινή Διαθήκη γράφτηκε στα ελληνικά. Αυτός ο συνδυασμός γλωσσών αντανακλά την προέλευση των διαφορετικών ανθρώπων που συνέβαλαν στη Βίβλο, καθώς οι προφορικές και γραπτές γλώσσες διέφεραν ανάλογα με την εθνικότητα, την τάξη και την εκπαίδευση. Τρεις από τις τέσσερις γλώσσες θεωρούνται νεκρές γλώσσες, που σημαίνει ότι δεν ομιλούνται πια, αν και οι μελετητές συνεχίζουν να τις διαβάζουν και να τις μελετούν. Το τέταρτο, το εβραϊκό, χρησιμοποιείται ακόμα σε μέρη της Μέσης Ανατολής και στα Βιβλία της Τορά, της Εβραϊκής Βίβλου.
Η αραμαϊκή είναι ίσως η λιγότερο γνωστή από τις γλώσσες των βιβλικών χρόνων. Αυτός ο όρος αναφέρεται στην πραγματικότητα σε μια οικογένεια αρχαίων σημιτικών γλωσσών που ομιλούνταν ευρέως σε όλη τη Μέση Ανατολή. Η αραμαϊκή έχει στενή σχέση με την εβραϊκή, η οποία δανείστηκε τη γραφή για το αλφάβητό της. Η βιβλική αραμαϊκή δεν χρησιμοποιείται πλέον, αν και οι σύγχρονες γλώσσες της οικογένειας χρησιμοποιούνται σε διάσπαρτα μέρη του κόσμου για λειτουργία, θρησκευτική πρακτική και επικοινωνία σε ορισμένες περιοχές. Η γλώσσα ήταν η κοινή γλώσσα στην Παλαιστίνη και πιθανότατα ήταν η γλώσσα που μιλούσε ο ίδιος ο Ιησούς. Στη Μέση Ανατολή αντικαταστάθηκε από τα αραβικά τον έβδομο αιώνα.
Τα ελληνικά που μιλούνταν στους Βιβλικούς χρόνους ήταν η Κοινή Ελληνική, η οποία σχετίζεται με τη Νέα Ελληνική, αν και αρκετά διαφορετική ώστε οι νεοελληνόφωνοι να μην μπορούν να την καταλάβουν. Η κοινή ελληνική ήταν μια πιο βασική διάλεκτος από την εκλεπτυσμένη αρχαία ελληνική που χρησιμοποιούσαν ο Αριστοτέλης και ο Πλάτωνας. Ενώ τα βιβλικά ελληνικά δεν ομιλούνται πλέον, ορισμένοι μελετητές εξακολουθούν να διαβάζουν την Καινή Διαθήκη σε αυτή τη γλώσσα. Πολλοί Έλληνες ομιλητές και λόγιοι έζησαν στα ανατολικά μέρη της ρωμαϊκής αυτοκρατορίας και συνεισέφεραν γλώσσα και πολιτισμό στην περιοχή.
Τα λατινικά μιλούσαν μελετητές και διοικητές. Ήταν η επίσημη γλώσσα της Ρωμαϊκής Αυτοκρατορίας και τα έγγραφα, τα διατάγματα και οι ανακοινώσεις θα είχαν προσφερθεί σε αυτή τη γλώσσα. Είναι απίθανο τα λατινικά να ομιλούνταν ευρέως στους απλούς πολίτες, αν και πιο μορφωμένα άτομα μπορεί να τα χρησιμοποιούσαν. Τα λατινικά δεν υιοθετήθηκαν για θρησκευτική λειτουργία παρά μόνο τον δεύτερο αιώνα, όταν εκτόπισαν τα ελληνικά σε όλη την αυτοκρατορία. Είναι ο μητρικός των ρομανικών γλωσσών, συμπεριλαμβανομένων των ιταλικών, γαλλικών, πορτογαλικών και ισπανικών.
Λίγοι άνθρωποι μιλούσαν Εβραϊκά στους Βιβλικούς χρόνους επειδή είχε αντικατασταθεί σε μεγάλο βαθμό από τα Αραμαϊκά, αλλά οι περισσότεροι Εβραίοι διάβαζαν τη Βίβλο στα Εβραϊκά, ωστόσο. Μια αναβίωση το 1800 επανέφερε τη Βιβλική Εβραϊκή, διατηρώντας την ως ζωντανή γλώσσα, αν και ομιλείται από περιορισμένο αριθμό ατόμων.
Αυτές οι τέσσερις βασικές γλώσσες αντιπροσωπεύουν μια ποικιλία πολιτισμών και εθνοτήτων, οι οποίες κατέχουν εξέχουσα θέση στη Βίβλο. Οι βιβλικολόγοι συχνά μελετούν δύο ή περισσότερες από αυτές τις γλώσσες σε μια προσπάθεια να αποκτήσουν μια βαθύτερη κατανόηση της Βίβλου και των ανθρώπων που κατοικούν στις σελίδες της.