Procedura ELISA este o procedură utilizată pentru a efectua o matrice imunosorbantă legată de enzime (ELISA), un test care poate fi utilizat pentru a identifica prezența proteinelor specifice și pentru a determina concentrațiile acestora. Există de fapt o serie de proceduri diferite care pot fi utilizate pentru un test ELISA, inclusiv proceduri directe, indirecte și așa-numitele proceduri „sandwich”. În toate cazurile, procedura ELISA este efectuată într-un laborator în condiții controlate pentru a minimiza riscul de rezultate false.
Pentru a efectua un test ELISA, este necesar să aveți o probă, cum ar fi sânge. Un motiv comun pentru a efectua un ELISA este testarea expunerii la un agent infecțios, caz în care proba în cauză poate avea sau nu o anumită proteină, iar testul este efectuat pentru a căuta proteina respectivă. Testul poate fi folosit și pentru a verifica concentrația unei proteine.
Pentru a efectua testul, este adesea folosit un dispozitiv numit placă de microtitrare. Fanii dramelor medicale și criminale sunt probabil familiarizați cu plăcile de microtitrare; arată ca niște tăvițe cu un număr de inserții, fiecare ținând o fiolă. În procedura ELISA sandwich, tehnicianul începe prin a acoperi flacoanele cu un antigen cunoscut într-o concentrație cunoscută și apoi le spală cu o soluție tampon. Apoi, se adaugă un ser făcut dintr-o probă de pacient spălată în aceeași soluție tampon.
Dacă pacientul are anticorpi împotriva antigenilor deja în tuburi, aceștia se vor lipi de părțile laterale ale tuburilor. Următorul pas în procedura ELISA implică introducerea aceluiași antigen, marcat cu o enzimă, în tuburi. Antigenul se blochează pe anticorpii care s-au lipit de părțile laterale ale tuburilor. Enzima fluoresce sau își schimbă culoarea, permițând tehnicianului să vadă că serul are anticorpi care s-au blocat la antigene și să determine concentrația, pe baza intensității reacției enzimatice.
O procedură ELISA este foarte sensibilă și extrem de precisă, tehnicienii utilizând antigene foarte specifice pentru a se asigura că identifică anticorpii potriviți sau invers, în funcție de tipul de test efectuat. Cu toate acestea, se întâmplă fals pozitive. Într-un exemplu de fals pozitiv, testarea ELISA este folosită în mod obișnuit pentru a verifica semnele de expunere la HIV și, uneori, dă un fals pozitiv, deoarece soluția se poate lega de o proteină asociată cu HIV pe care unii oameni o au fără a fi infectate. Acesta este motivul pentru care un pozitiv trebuie confirmat cu un Western Blot.