Un anticorp imunohistochimic (IHC) este un reactiv utilizat în mod obișnuit în studiile științifice pentru a marca antigenele de interes. Un antigen este orice moleculă mică care poate provoca o reacție imună care forțează producția de anticorpi împotriva acelui antigen singular. Pe baza sistemului imunitar al mamiferelor, producția de anticorpi este un singur pas într-un proces de identificare a materialului ca străin, astfel încât organismul să poată ataca și expulza substanța invazivă, fie că este vorba despre un virus, o infecție bacteriană sau o moleculă mică, cum ar fi polenul.
Anticorpii pot avea o specificitate extraordinară și o capacitate de legare în marcarea antigenelor. Această specificitate este exploatată în beneficiul oamenilor de știință atunci când producția de anticorpi este orientată către identificarea antigenelor specifice de interes. O secțiune subțire de țesut poate fi colorată cu un anticorp, astfel încât experimentatorul să poată identifica cu ușurință toate situsurile antigenului prezente în acea probă. Multe companii sunt specializate în crearea de anticorpi, ceea ce face ca un vast catalog de anticorpi colectiv să fie disponibil oamenilor de știință și experimentatorilor.
Un anticorp IHC este utilizat în diferite tehnici experimentale. Colorarea cu anticorpi în secțiuni subțiri de țesut încorporate în parafină sau plastic este adesea folosită, astfel încât antigenele să poată fi găsite in situ. Un anticorp IHC poate fi, de asemenea, utilizat în tehnici experimentale de precipitare, cum ar fi un test de co-imunoprecipitare, concentrându-se pe scoaterea antigenelor din soluție pentru a cuantifica cantitatea de antigen prezentă într-o bucată mare de țesut. Testele care măsoară cantitatea de lumină care este capabilă să treacă printr-o placă de cultură tisulară după ce un supernatant a fost expus la fundul unui anticorp IHC bine pre-acoperit sunt, de asemenea, adesea folosite pentru a cuantifica cantitatea de antigen într-un mediu omogenizat. proba de tesut.
Este posibil să existe protocoale de colorare a anticorpilor care se bazează pe utilizarea unui singur anticorp pentru detectarea antigenului. Aceste protocoale sunt utilizate de obicei pe probe de țesut care sunt încorporate într-un substrat nereactiv și montate pe o lamă de sticlă. Aceste proceduri de colorare cu un singur anticorp sunt, de asemenea, populare în laboratoarele care își etichetează proprii anticorpi cu molecule de detectare, cum ar fi fluorofori.
Mai frecvent, totuși, protocoalele de colorare a anticorpilor necesită utilizarea de anticorpi primari și secundari. Un anticorp IHC primar este crescut împotriva unui antigen specific, care ar putea fi studiat mai puțin frecvent. Un anticorp IHC secundar va fi generat împotriva anticorpului IHC primar. Anticorpul secundar va fi marcat, totuși, la o moleculă de identificare, cum ar fi biotina sau un fluorofor. Această tehnică cu doi anticorpi este comună, deoarece companiile economisesc bani adăugând fluorofori sau reactivi de marcare scumpi la cantități mari de anticorpi generați împotriva markerilor imuni ai unei anumite specii, mai degrabă decât etichetarea reactivilor scumpi la un anticorp produs împotriva unui antigen care ar putea fi studiat de foarte puțini. oameni de știință.