Testarea endotoxinelor bacteriene implică de obicei utilizarea de reactivi care, atunci când sunt amestecați într-o soluție cu un posibil contaminant, provoacă o reacție, ceea ce înseamnă prezența unei endotoxine. Testarea cromogenă, testul cheagurilor de gel și testarea turbidimetrică sunt metodele pe care oamenii de știință le folosesc în mod obișnuit pentru testarea endotoxinelor bacteriene. Tehnicienii folosesc aceste metode de evaluare pe o varietate de substanțe și obiecte atunci când verifică contaminarea cu endotoxine. Apa, materiile prime folosite la fabricarea medicamentelor, echipamentele și ambalajele trebuie să treacă toate standardele de endotoxine.
Bacteriile, ciupercile și virusurile au toate membranele exterioare de protecție constând din lipopolizaharide, denumite și LPS. Porțiunea lipidică a acestor lanțuri conține endotoxine. Aceste substanțe rămân în general în interiorul membranei, dar sunt eliberate în timpul procesului de diviziune celulară și în timpul distrugerii sau lizei celulare. La oameni, aceste substanțe provoacă febră, coagulare anormală, șoc septic și alte simptome, deși spre deosebire de exotoxinele din interiorul celulei, endotoxinele nu se transformă într-un toxoid. În general, microbiologii verifică prezența endotoxinelor asociate cu diferite bacterii gram-negative, inclusiv E. coli.
Testul cheagurilor de gel, sau testul Limulus ameboecyte lysate (LAL), implică utilizarea unei substanțe chimice de distrugere a membranei derivate din amoebocitele crabului potcoavă, denumită și Limulus polyphemus. Tehnicienii observă o indicație pozitivă a endotoxinelor dacă apare coagularea sau gelificarea atunci când lizatul este expus obiectului sau substanței în cauză. Microbiologii folosesc de obicei această metodă de testare a endotoxinelor bacteriene împreună cu testele cromogenice și turbidimetrice pentru rezultate concludente.
Testarea endotoxinelor bacteriene cromogene utilizează un LAL special tratat. Când acest lizat intră în contact cu o endotoxină, reacția produce o culoare specifică. Procesul final de testare include măsurarea turbidității sau turbidității soluției. Tehnicienii expun soluția formată în testul cheagului de gel la un spectrofotometru, care emite un fascicul de lumină. Măsurând pierderea intensității luminii în fasciculul pe măsură ce acesta trece prin soluție, microbiologii pot determina dacă este prezentă sau nu o endotoxină.
Asociații de laborator efectuează, în general, aceste trei teste de endotoxine bacteriene de două sau trei ori pentru a asigura rezultate precise. Testul cu gel nu este utilizat exclusiv, deoarece limita sa cea mai inferioară de detecție este de 0.03 unități Ehrlich per mililitru (EU/ml). Testele cromogene și turbidimetrice detectează endotoxinele în intervalul 0.005 EU/ml. Parametrii de siguranță diferă foarte mult în funcție de substanța testată. În timp ce apa sterilă utilizată în scopuri de injectare sau irigare nu poate conține mai mult de 0.25 EU/ml, apa sterilă pentru inhalare poate conține până la 0.5 EU/ml.