Η φωσφορυλίωση πρωτεΐνης είναι η προσθήκη μιας φωσφορικής ομάδας (PO4) σε μια συγκεκριμένη πρωτεΐνη, συνήθως σε ένα υπόλειμμα σερίνης, θρεονίνης ή τυροσίνης. Γενικά, η φωσφορυλίωση πρωτεϊνών είναι ένας από τους κύριους τρόπους με τους οποίους η μεταγωγή σήματος και οι ενζυματικές δραστηριότητες ρυθμίζονται στα κύτταρα. Τα αντισώματα που ανιχνεύουν αυτές τις θέσεις φωσφορυλιωμένης πρωτεΐνης ονομάζονται φωσφοαντισώματα. Η ικανότητα ανίχνευσης του φωσφορυλιωμένου υπολείμματος μιας πρωτεΐνης σε μια συγκεκριμένη θέση είναι ένα πολύτιμο εργαλείο για την ανίχνευση της δραστηριότητας των μονοπατιών σηματοδότησης των κυττάρων και είναι ένα κλειδί για την κατανόηση πολλών διαδικασιών κυτταρικής σηματοδότησης.
Η προσθήκη της φωσφορικής ομάδας σε ένα υπόλειμμα σερίνης, θρεονίνης ή τυροσίνης μπορεί να οδηγήσει σε ενεργοποίηση ή αδρανοποίηση πρωτεΐνης είτε προκαλώντας μια διαμορφωτική αλλαγή στην πρωτεΐνη είτε επηρεάζοντας τις αλληλεπιδράσεις της πρωτεΐνης με άλλες πρωτεΐνες ή μόρια. Η φωσφορυλίωση παίζει σημαντικό ρόλο σε πολλές σημαντικές διεργασίες κυτταρικής σηματοδότησης, συμπεριλαμβανομένης της κυτταρικής ανάπτυξης και θανάτου, οδών που επάγουν ή αναστέλλουν την ογκογένεση, διεργασίες ορμονικής σηματοδότησης και παραγωγής ενέργειας. Οι πρωτεΐνες φωσφορυλιώνονται από ένζυμα που ονομάζονται κινάσες και αποφωσφορυλιώνονται από ένζυμα που ονομάζονται φωσφατάσες. Η διαδικασία της αναστρέψιμης φωσφορυλίωσης επομένως επιτρέπει σε ένα κύτταρο να ασκεί αυστηρό έλεγχο σε αυτές τις σημαντικές οδούς σηματοδότησης.
Τα αντισώματα είναι μόρια σχήματος Υ που περιέχουν θέσεις δέσμευσης αντιγόνου στο τέλος κάθε βραχίονα Υ. Γενικά, τα αντισώματα αναγνωρίζουν μοναδικές αλληλουχίες στα αντίστοιχα αντιγόνα τους, τα οποία ονομάζονται επίτοποι. Η παραγωγή αντισωμάτων συμβαίνει φυσικά ως μέρος της ανοσοαπόκρισης όταν ένας ξενιστής εκτίθεται σε ένα ξένο σώμα, επιτρέποντας στο αντίσωμα να αναγνωρίσει και να εξουδετερώσει συγκεκριμένα αυτά τα ξένα αντιγόνα. Αυτή η φυσική διαδικασία μπορεί να χρησιμοποιηθεί για ερευνητικούς σκοπούς δημιουργώντας αντισώματα που θα ανιχνεύσουν ειδικά ένα αντιγόνο ή πρωτεΐνη ενδιαφέροντος. Όταν δημιουργούνται ερευνητικά αντισώματα, το είδος ξενιστή είναι συχνά κουνέλια, ποντίκια, πρόβατα ή κατσίκες, αλλά οι ερευνητές μπορούν επίσης να χρησιμοποιήσουν κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος σε καλλιέργεια για να δημιουργήσουν αντισώματα κατά του αντιγόνου που μας ενδιαφέρει.
Τα αντισώματα φωσφο μπορούν να χρησιμοποιηθούν είτε σε ερευνητικές είτε σε κλινικές εφαρμογές. Σε κλινικές συνθήκες, η ανίχνευση μιας συγκεκριμένης φωσφορυλιωμένης πρωτεΐνης από ένα φωσφοαντίσωμα σε δείγμα όγκου μπορεί να βοηθήσει στην αξιολόγηση του βαθμού του όγκου ή ακόμη και στην πρόβλεψη της έκβασης της νόσου. Σε ερευνητικά περιβάλλοντα, τα φωσφοαντισώματα χρησιμοποιούνται συχνά για τη μελέτη της ενεργοποίησης των οδών κυτταρικής σηματοδότησης ως απόκριση σε ένα συγκεκριμένο ερέθισμα.
Πολλές εταιρείες παραγωγής αντισωμάτων είναι διαθέσιμες για την παροχή φωσφοαντισωμάτων σε ερευνητές και κλινικούς γιατρούς. Οι ερευνητές μπορούν να επιλέξουν αυτά τα αντισώματα από έναν κατάλογο αντισωμάτων, ο οποίος συχνά περιέχει αντιδραστήρια για εκατοντάδες διαφορετικές φωσφορυλιωμένες πρωτεΐνες. Επιπλέον, αρκετοί προμηθευτές αντισωμάτων προσφέρουν την παραγωγή προσαρμοσμένων αντισωμάτων για σπάνια μελετημένες φωσφορυλιωμένες πρωτεΐνες για τις οποίες δεν υπάρχει διαθέσιμο εμπορικό αντίσωμα φωσφο.