Μια δοκιμασία ELISA είναι μια διαδικασία δοκιμών που ανιχνεύει ουσίες με σκοπό τον εντοπισμό ορισμένων ασθενειών, αλλεργιών και παράνομων ναρκωτικών στο σώμα. Είναι επίσης γνωστό ότι χρησιμοποιείται για την ανίχνευση του ιού της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας (HIV). Μερικές από τις ουσίες που μπορεί να ανιχνεύσει είναι αντισώματα, ορμόνες και πρωτεΐνες. Η κύρια αρχή πίσω από τον προσδιορισμό ELISA είναι ότι μια χημική αντίδραση μεταξύ του υγρού δείγματος ενός ασθενούς και ενός συγκεκριμένου εργαστηριακού δείγματος υποδεικνύει την παρουσία μιας συγκεκριμένης ουσίας που σχετίζεται με μια συγκεκριμένη ασθένεια ή ιατρική κατάσταση. Το ELISA, ως ακρωνύμιο, σημαίνει «ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία».
Η εφεύρεση και η ανάπτυξη της ανάλυσης ELISA προέκυψε επειδή υπήρχε ανάγκη για μια ασφαλέστερη μέθοδο δοκιμής, διαφορετική από τη ραδιοανοσοδοκιμασία, η οποία χρησιμοποιεί ραδιενέργεια για την παραγωγή μιας χημικής αντίδρασης. Στη δεκαετία του 1960, δύο ξεχωριστές ομάδες επιστημόνων με επικεφαλής τον Στρατή Αβραμέα και τον GB Pierce κατόρθωσαν να συνδυάσουν ορισμένα αντισώματα με ορισμένα ένζυμα και να παράγουν μια χημική αντίδραση από τον συνδυασμό. Με αυτή τη γνώση, δύο επιστήμονες από το Πανεπιστήμιο της Στοκχόλμης, ο Peter Perlmann και η Eva Engvall, επινόησαν τη μέθοδο ELISA, δημοσιεύοντας τα πειράματά τους και το σύστημα πίσω από τον προσδιορισμό το 1971. Από τότε, η ανάλυση ELISA χρησιμοποιείται παγκοσμίως, αν και η ραδιοανοσοδοκιμασία είναι εξακολουθεί να είναι διαθέσιμο λόγω του μικρότερου κόστους του.
Υπάρχουν δύο συνήθεις τύποι ανάλυσης ELISA: η άμεση και η έμμεση μέθοδος, η τελευταία χρησιμοποιείται πιο συχνά. Το πρώτο βήμα θα ήταν η εξαγωγή ενός δείγματος από τον ασθενή, συνήθως αίματος ή ούρων, τα οποία μπορεί να υποβληθούν σε διαδικασία διαχωρισμού για την εξαγωγή του διαυγούς ορού που περιέχει τα αντισώματα. Ένα κιτ ELISA περιέχει συχνά μια πλάκα που περιέχει 96 μίνι δοχεία που ονομάζονται «πηγάδια», τα οποία θα είναι επικαλυμμένα με ένα αντιγόνο που μπορεί πιθανώς να έχει μια αντίδραση σε ένα παρόν αντίσωμα. Ένα αντιγόνο θεωρείται συχνά μια ξένη ουσία στην οποία το σώμα επιτίθεται παράγοντας συγκεκριμένα αντισώματα, επομένως εάν ένας ασθενής έχει αποκτήσει ένα αντιγόνο από μια συγκεκριμένη ασθένεια, ο ορός του πρέπει να περιέχει αντισώματα που αντιστοιχούν στο εν λόγω αντιγόνο.
Στη συνέχεια, ο ορός του ασθενούς θα χυθεί στα φρεάτια και στη συνέχεια θα επωαστεί για να αφήσει τα αντισώματα να προσκολληθούν στην πρωτεϊνική επικάλυψη. Μετά την περίοδο επώασης, τα φρεάτια ξεπλένονται για να αφαιρεθεί ο υπόλοιπος ορός και άλλα αντισώματα που δεν έχουν δεσμευτεί στην επικάλυψη. Ένα άλλο σύνολο αντισωμάτων που εξάγονται από ζώα, συνήθως αρουραίους, θα χυθεί στα φρεάτια για να ανιχνευθούν τα ανθρώπινα αντισώματα και λαμβάνει χώρα μια άλλη περίοδος επώασης και τα ζωικά αντισώματα θα ξεπλυθούν ξανά. Στη συνέχεια θα προστεθεί ένα υπόστρωμα ενζύμου, έτσι ώστε η αντίδραση να είναι ορατή με χρώματα. Συνήθως, μια έντονη απόχρωση του χρώματος θα υποδηλώνει ένα θετικό αποτέλεσμα, πράγμα που σημαίνει ότι ο ασθενής έχει υποβληθεί σε έλεγχο για τη νόσο ή άλλες ιατρικές καταστάσεις.