Wnioski o ubezpieczenie na życie lub ubezpieczenie zdrowotne często zawierają test na wykrywanie nikotyny. Chromatografia gazowo-cieczowa może wykryć nikotynę — lub jej główny metabolit kotyniny — w próbkach moczu, krwi, śliny i włosów. Za najbardziej czułą technikę wykrywania nikotyny uważa się pomiar kotyniny w moczu. Żaden z tych testów nie rozróżni doskonale między palącymi aktywnymi, biernymi lub biernymi palaczami a osobami niepalącymi, ponieważ indywidualne różnice w metabolizmie nikotyny są bardzo zróżnicowane. Jednak testy na wykrywanie nikotyny dadzą dobre oszacowanie ogólnego narażenia na nikotynę.
Nikotyna to uzależniająca substancja chemiczna występująca w papierosach i tytoniu do żucia. Żucie lub wdychanie tytoniu wprowadza nikotynę do organizmu, gdzie jest metabolizowana przez wątrobę i wydalana z moczem. Głównym metabolitem nikotyny jest kotynina, która jest podstawową metodą wykrywania nikotyny, ponieważ ma okres półtrwania do 10 razy dłuższy niż nikotyna. Innymi słowy, jest stabilny w organizmie znacznie dłużej. W przypadkach podejrzenia przedawkowania nikotyny, np. gdy dziecko zjada gumę nikotynową, zamiast kotyniny mierzy się nikotynę.
Wykrywanie nikotyny za pomocą próbek włosów jest rzadkością poza testami eksperymentalnymi, ponieważ jest kosztowne. Jednak badanie włosów może ocenić długotrwałe używanie tytoniu, ponieważ może wykryć ekspozycję na nikotynę do 10 dni przed pobraniem próbki. Testy na nikotynę w ślinie są proste i nieinwazyjne; ślina jest wchłaniana z ust za pomocą ściereczki lub wacika na próbkę, ale pobranie wystarczająco dużej próbki może być trudne. Dzieci lub dorośli z suchością w ustach mogą nie wytwarzać wystarczającej ilości śliny dla próbki testowej. Testy śliny opierają się również na bardzo niedawnej ekspozycji na nikotynę i mogą nie odróżnić aktywnych palaczy na światło od palaczy biernych.
Próbki krwi pozwalają na wykrycie kotyniny w osoczu krwi, chociaż próbka krwi wymaga znacznie więcej przetwarzania niż próbki moczu czy śliny. Próbka krwi jest najpierw odwirowywana w celu oddzielenia komórek krwi od osocza, a następnie wytrącane są ciężkie białka. Probówkę odwirowuje się po raz drugi, a następnie umieszcza w wyparce w celu usunięcia pozostałej cieczy; suche białka, w tym kotyninę, rozpuszcza się za pomocą alkoholu metylowego. Probówkę ponownie odwirowuje się w celu oddzielenia wszelkich pozostałych ciężkich białek, a płyn wylewa i wykorzystuje do analizy. Ten proces jest bardziej czasochłonny i kosztowny niż badanie moczu lub śliny.
Wykrywanie nikotyny za pomocą moczu jest bardzo czułe i pozwala wykryć nawet niewielkie ilości biernego palenia. Jest to najczęstsza metoda stosowana przez firmy ubezpieczeniowe w celu odróżnienia palaczy aktywnych od palaczy biernych. Niezależnie od tego, czy wykrywanie nikotyny odbywa się za pomocą moczu, śliny czy surowicy krwi, można zaobserwować różnicę między osobami, które aktywnie palą trzy lub więcej papierosów dziennie, a osobami z wysokim poziomem biernego palenia. Nałogowych palaczy można również odróżnić od lekkich palaczy na podstawie ilości kotyniny w próbce.