Η διαδικασία ELISA ξεκινά στην κλινική, με τη λήψη δείγματος αίματος από τον ασθενή. Στη συνέχεια ακολουθούνται ορισμένα βήματα χρησιμοποιώντας το κιτ δοκιμής ELISA στο εργαστήριο. Το τεστ θα ανιχνεύσει την παρουσία αντισωμάτων ή αντιγόνων σε μια ασθένεια, όπως ο HIV, στο αίμα. Τα βήματα περιλαμβάνουν προσθήκη διαφόρων ουσιών και πλύσιμο και τα αποτελέσματα γενικά μετρώνται με αλλαγή χρώματος.
Η ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA), η οποία αναφέρεται επίσης ως η ενζυμική ανοσοδοκιμασία (EIA), χρησιμοποιείται ως διαγνωστική δοκιμή. Είναι πιο γνωστό ως διαγνωστικό τεστ για τον HIV. Η δοκιμαστική πλάκα αποτελείται συνήθως από 96 μικρά φρεάτια στα οποία ακινητοποιείται ένα συγκεκριμένο αντιγόνο. Εάν το αντίσωμα υπάρχει στο δείγμα ορού, θα συνδεθεί με το αντιγόνο, επιτρέποντας την ανίχνευση μέσω των διαφόρων σταδίων της διαδικασίας ELISA.
Το πρώτο βήμα στη διαδικασία ELISA είναι η λήψη δείγματος από τον ασθενή. Αυτό γίνεται από νοσοκόμα, υπό στείρες συνθήκες. Το αίμα λαμβάνεται συνήθως από μια φλέβα στο χέρι ή στο χέρι. Τοποθετείται τουρνικέ στον βραχίονα για να διογκωθεί η φλέβα και να διευκολυνθεί η διαδικασία και το δέρμα καθαρίζεται στο σημείο που θα μπει η βελόνα. Ένα μικρό τσίμπημα μπορεί να γίνει αισθητό καθώς μπαίνει η βελόνα και το αίμα θα συλλέγεται σε ένα αποστειρωμένο σωληνάριο.
Μετά τη λήψη του δείγματος αίματος, μεταφέρεται στο εργαστήριο όπου θα πραγματοποιηθεί η υπόλοιπη διαδικασία ELISA από τεχνικό εργαστηρίου. Το δείγμα αίματος προστίθεται πρώτα στα φρεάτια της πλάκας ELISA. Εάν υπάρχει το συγκεκριμένο αντίσωμα, δεσμεύεται στο αντιγόνο. Η πλάκα στη συνέχεια πλένεται, χρησιμοποιώντας ένα ρυθμιστικό διάλυμα, για να αφαιρεθούν τα μη δεσμευμένα αντισώματα.
Στη συνέχεια προστίθεται ένα δεύτερο αντίσωμα, συνήθως ζωικής προέλευσης, το οποίο έχει ένα ένζυμο που είναι συνδεδεμένο με αυτό, το οποίο θα δεσμευτεί στο σύμπλεγμα αντισώματος-αντιγόνου. Το πιάτο πλένεται ξανά, για να αφαιρεθεί η περίσσεια. Το ένζυμο αντιδρά στο χρώμα όταν προστίθεται υπόστρωμα στο τέλος της διαδικασίας ELISA. Είναι η μέτρηση του βαθμού αλλαγής χρώματος που δίνει το αποτέλεσμα.
Η διαδικασία ELISA πρέπει να ακολουθείται προσεκτικά για να αποφευχθούν ψευδή αποτελέσματα. Στις περισσότερες πλάκες ELISA περιλαμβάνεται θετικός και αρνητικός μάρτυρας, για την ελαχιστοποίηση τέτοιων ψευδών αποτελεσμάτων. Κατά τον έλεγχο για HIV, ένα θετικό αποτέλεσμα θα ακολουθείται συνήθως από ένα δεύτερο, επιβεβαιωτικό, τεστ, συχνά διαφορετικού τύπου, όπως ένα Western Blot.