Σε αντίθεση με αυτό που θα μπορούσε κανείς να σκεφτεί αρχικά, ένα αντίσωμα βιοτίνης δεν είναι μια ουσία που εγείρεται εναντίον της βιοτίνης. Αντίθετα, ένα αντίσωμα βιοτίνης είναι ένα αντίσωμα που έχει συζευχθεί με βιοτίνη. Η βιοτίνη συνδέεται ισχυρά με έναν συνδέτη – την αβιδίνη – η οποία μπορεί, με τη σειρά της, να συζευχθεί με μόρια ανιχνεύσιμα από το φως, όπως τα φθοροφόρα. Η βιοτίνη και η αβιδίνη σχηματίζουν έναν από τους ισχυρότερους βιολογικά σχετικούς ομοιοπολικούς δεσμούς που είναι γνωστοί, καθιστώντας τις συζευγμένες με βιοτίνη και αβιδίνη μονάδες προσδέματος/υποδοχέα ιδιαίτερα χρήσιμες σε επιστημονικές μελέτες.
Η βιοτίνη είναι μια βιταμίνη του συμπλέγματος Β — βιταμίνη Β7. Είναι ένα τόσο μικρό μόριο που πολλαπλά μόρια βιοτίνης μπορούν να συζευχθούν με ένα μόνο μονοκλωνικό ή πολυκλωνικό αντίσωμα. Το γεγονός ότι η βιοτίνη είναι επίσης υδατοδιαλυτή επιτρέπει μεγαλύτερη ευελιξία στα ρυθμιστικά συστήματα από ό,τι αν ήταν αδιάλυτη. Για μεγαλύτερη εξειδίκευση, η σύζευξη μονοκλωνικών αντισωμάτων με βιοτίνη συνιστάται συχνά έναντι της σύζευξης πολυκλωνικών αντισωμάτων. Το μόριο βιοτίνης μπορεί να συνδεθεί απευθείας με το αντίσωμα που μας ενδιαφέρει ή μπορεί να συνδεθεί μέσω μιας μοριακής ουράς για να επιτρέψει περισσότερη ελευθερία κινήσεων.
Ο συνδέτης βιοτίνης αβιδίνη βρίσκεται στη λευκωματίνη του αυγού. Μπορεί να κατασκευαστεί φθηνά και να απομονωθεί εύκολα. Πολλαπλά μόρια αβιδίνης θα συνδεθούν σε κάθε υποδοχέα βιοτίνης, ενισχύοντας ένα μόνο σήμα ανίχνευσης αντισωμάτων. Όταν ένα αντίσωμα βιοτίνης προσκολλάται σε ένα αντιγόνο ενδιαφέροντος, ένας πειραματιστής μπορεί στη συνέχεια να εκθέσει το σύμπλοκο σε αβιδίνη συζευγμένη με φθοροφόρα, καθιστώντας το σύμπλοκο ανιχνεύσιμο. Μέσω φθορίζουσας απεικόνισης, το αντίσωμα βιοτίνης και ο συζευγμένος με αβιδίνη συνδέτης μπορούν να ανιχνευθούν με μικροσκόπιο φωτός και τα αντιγόνα ενδιαφέροντος μπορούν να μελετηθούν in situ.
Αν και η δημιουργία και η χρήση ενός αντισώματος βιοτίνης και ενός μορίου αβιδίνης με σήμανση φθορισμού είναι μια κοινή λύση για την ανίχνευση αντιγόνου, υπάρχουν εναλλακτικές λύσεις που εξακολουθούν να χρησιμοποιούν το σύμπλεγμα βιοτίνης/αβιδίνης. Η δέσμευση της βιοτίνης σε έναν συνδέτη όπως μια νευροτοξίνη μπορεί να είναι επωφελής στην ανίχνευση της τοποθέτησης νευρωνικών υποδοχέων που επηρεάζονται από την εν λόγω νευροτοξίνη. Είναι επίσης δυνατό να συζευχθεί η βιοτίνη με μια νουκλεοτιδική αλληλουχία όπως το αγγελιοφόρο ριβονουκλεϊκό οξύ (mRNA) για να βρεθεί πού μεταφράζονται αυτές οι αλληλουχίες νουκλεοτιδίων σε πρωτεΐνες ή για να ανιχνευθεί η ρύθμιση του κυτταρικού mRNA.
Είναι δυνατή η αγορά βιοτινυλιωμένων πολυκλωνικών ή μονοκλωνικών αντισωμάτων, αν και η παραγωγή βιοτινυλιωμένων αντισωμάτων είναι εντός της ικανότητας πολλών πειραματιστών. Πρωτόκολλα μπορούν να βρεθούν στο διαδίκτυο που προτείνουν μεθόδους βιοτινυλίωσης αντισωμάτων, αν και τα πιο εύκολα ακολουθούμενα πρωτόκολλα συνδέουν απευθείας τη βιοτίνη με ένα αντίσωμα αντί να προτείνουν τον τρόπο παρεμβολής ενός μοριακού διαχωριστή. Οι μοριακοί διαχωριστές μεταξύ της βιοτίνης και του συσχετιζόμενου αντισώματος της επιτρέπουν μεγαλύτερη απόσταση για να εκτεθούν περισσότερα μόρια σε θέσεις δέσμευσης, και αυτά τα αντισώματα βιοτίνης συνήθως αγοράζονται αντί να παρασκευάζονται.