Ο όρος «λατρεία μυστηρίου» χρησιμοποιείται για να αναφερθεί σε ορισμένες θρησκευτικές οργανώσεις που άκμασαν στην Αρχαία Ελλάδα και τη Ρώμη. Η συμμετοχή σε αυτές τις οργανώσεις έκλεισε, με τις διαδικασίες ανοιχτές μόνο σε επιλεγμένους μυημένους, και αυτές οι ομάδες ήταν εξαιρετικά μυστικοπαθείς από τη φύση τους. Οι ιστορικοί έχουν μια ποικιλία πηγών για πληροφορίες που μπορούν να αντλήσουν κατά την έρευνα των μυστηριακών λατρειών, συμπεριλαμβανομένων των γραπτών ανθρώπων που συμμετείχαν σε τελετές και τελετές που σχετίζονται με αυτές τις οργανώσεις.
Τόσο η Ελλάδα όσο και η Ρώμη είχαν κρατικές θρησκείες, με όλα τα μέλη της κοινωνίας να συμμετέχουν στη λατρεία των θεών. Έλληνες και Ρωμαίοι επισκέπτονταν ναούς, έκαναν θυσίες και προσεύχονταν στους θεούς τόσο δημόσια όσο και στο σπίτι, και οι περισσότεροι είχαν βωμούς στο σπίτι για προσωπική λατρεία. Για πολλούς πολίτες αρκούσε η κρατική θρησκεία, ικανοποιώντας την ανάγκη για θρησκευτική πίστη και πρακτική.
Για άλλους, ωστόσο, η κρατική θρησκεία ένιωθε ανεπαρκής ή ελλιπής, και ως αποτέλεσμα, προέκυψαν λατρείες μυστηρίου. Τα μέλη αυτών των οργανώσεων λάτρευαν συγκεκριμένους θεούς και θεές, επιλέγοντας συχνά σκοτεινά άτομα για να επικεντρωθούν, αντί για γνωστά και ήδη καλά λατρεμένα άτομα. Ορισμένες λατρείες μυστηρίου ενσωμάτωσαν ακόμη και θρησκευτικές προσωπικότητες από άλλους πολιτισμούς. Η Ίσις, για παράδειγμα, λατρευόταν στη Ρώμη. Μερικά διάσημα παραδείγματα λατρειών μυστηρίου περιλαμβάνουν τα Ελευσίνια, τα Διονυσιακά και τα Ορφικά Μυστήρια, αν και υπήρχαν και πολλές άλλες ομάδες.
Το «μυστήριο» στη «λατρεία μυστηρίου» προέρχεται από το ελληνικό musterion, το οποίο χρησιμοποιείται για να αναφέρεται σε ένα μυστικό δόγμα ή ιεροτελεστία. Όταν οι άνθρωποι εντάχθηκαν στα μυστήρια, αναγκάστηκαν να περάσουν από μια μύηση και αναμενόταν να φυλάξουν τα μυστικά της οργάνωσης. Οι άνθρωποι που αποκάλυπταν μυστικά από τα μυστήρια θα μπορούσαν να υποβληθούν σε αυστηρές τιμωρίες ή δημόσια καταδίκη, καθώς το καθοριστικό χαρακτηριστικό μιας λατρείας μυστηρίου ήταν η αποκλειστικότητά της, επομένως οι αποκαλύψεις σχετικά με τις πράξεις μιας λατρείας μυστηρίου θα ήταν αρκετά ανεπιθύμητες.
Οι εκδηλώσεις σε τελετές και πάρτι που διοργανώνονται από ορισμένες από αυτές τις ελληνορωμαϊκές λατρείες είναι μάλλον διαβόητες. Εκτός από τη διοργάνωση θυσιών ζώων, μερικές μυστηριώδεις λατρείες είχαν επίσης πλούσια γεύματα, διοργάνωσαν περίτεχνα πάρτι και συμμετείχαν σε μια σειρά από δραστηριότητες που θα θεωρούνταν δυσάρεστες, ακόμη και από τους ανθρώπους της εποχής. Οι μυημένοι αυτών των μυστηριωδών λατρειών έπαιρναν ναρκωτικά για να ενισχύσουν τη θρησκευτική τους εμπειρία και τα στοιχεία δείχνουν σθεναρά ότι τα μέλη συμμετείχαν επίσης σε μια ποικιλία σεξουαλικών δραστηριοτήτων. Η συνδυασμένη γοητεία της μυστικότητας και των κοινωνικά απαράδεκτων δραστηριοτήτων πρέπει να ήταν μια ισχυρή έλξη για πολλά μέλη της λατρείας μυστηρίου.