Τι είναι το αντιβιόγραμμα;

Μια εξέταση αντιβιογράμματος μπορεί να χρησιμοποιηθεί για δύο διαφορετικούς σκοπούς. Η μέθοδος Kirby-Bauer χρησιμοποιείται για τον έλεγχο της ευαισθησίας ενός βακτηριακού στελέχους σε διάφορα αντιβιοτικά. Τα αντιβιογράμματα μπορούν επίσης να καθορίσουν την ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση (MIC) ή τη μικρότερη συγκέντρωση ενός αντιβιοτικού που θα αναστείλει την ανάπτυξη βακτηριακού στελέχους, χρησιμοποιώντας τη μέθοδο της αραίωσης.

Η μέθοδος Kirby-Bauer είναι ένα αντιβιόγραμμα που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό του καλύτερου αντιβιοτικού για χρήση έναντι ενός συγκεκριμένου βακτηριακού στελέχους. Οι δοκιμές εκτελούνται σε τρυβλία Petri, τα οποία είναι ρηχά, στρογγυλά, καλυμμένα πιάτα γεμάτα με μέσο άγαρ ή ουσία που μοιάζει με γέλη, εγχυμένη με θρεπτικά συστατικά για την προώθηση της βακτηριακής ανάπτυξης. Το βακτηριακό στέλεχος που πρόκειται να δοκιμαστεί κατανέμεται ομοιόμορφα στην επιφάνεια της πλάκας. Αρκετοί κυκλικοί χάρτινοι δίσκοι, ο καθένας εμποτισμένος με διαφορετικό αντιβιοτικό, τοποθετούνται ομοιόμορφα στην επιφάνεια της πλάκας και ωθούνται απαλά προς τα κάτω στο άγαρ για να έρθουν σε επαφή με τα βακτήρια. Οι πλάκες στη συνέχεια αφήνονται να αναπτυχθούν όλη τη νύχτα σε επωαστήρα.

Μετά την ολονύκτια επώαση, μια κυκλική περιοχή χωρίς βακτηριακή ανάπτυξη θα περιβάλλει κάθε χάρτινο δίσκο. Αυτή η περιοχή ονομάζεται ζώνη αναστολής. Η διάμετρος της ζώνης αναστολής για κάθε δίσκο μετράται και συγκρίνεται με ένα διάγραμμα ελέγχου για να προσδιοριστεί εάν το βακτηριακό στέλεχος που δοκιμάστηκε είναι ανθεκτικό, ενδιάμεσο ή ευαίσθητο σε καθένα από τα διαφορετικά αντιβιοτικά. Μια μεγάλη ζώνη αναστολής θα σήμαινε ότι το βακτηριακό στέλεχος είναι ευαίσθητο στο αντιβιοτικό στον δοκιμαστικό δίσκο.

Η μέθοδος αραίωσης είναι ένα αντιβιόγραμμα που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της αποτελεσματικότερης συγκέντρωσης αντιβιοτικού έναντι ενός στελέχους βακτηρίων. Ξεκινά με την καλλιέργεια ή την ανάπτυξη μιας νέας παρτίδας του δοκιμαστικού βακτηρίου κατά τη διάρκεια της νύχτας και στη συνέχεια ελέγχοντας τις νέες καλλιέργειες για καθαρότητα ή καθαρίζοντας την καλλιέργεια. Παρασκευάζονται επίσης δύο βακτήρια ελέγχου ή σύγκρισης. Η συγκέντρωση του βακτηριακού στελέχους προσδιορίζεται χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο και η συγκέντρωση προσαρμόζεται σε ένα εύρος κατάλληλο για τη μέθοδο αραίωσης.

Παρασκευάζεται σειριακή αραίωση των προς δοκιμή αντιβιοτικών κάνοντας αυξανόμενες και βαθμιαίες αλλαγές της συγκέντρωσης σε διαφορετικά φιαλίδια. Μια σειρά από τις ποικίλες συγκεντρώσεις αντιβιοτικού ενοφθαλμίζεται με ίσες ποσότητες του δοκιμαστικού βακτηριακού στελέχους και η άλλη σειρά εμβολιάζεται με τα βακτηριακά στελέχη ελέγχου. Όλες οι εμβολιασμένες συγκεντρώσεις αντιβιοτικού αφήνονται να αναπτυχθούν κατά τη διάρκεια της νύχτας σε επωαστήρα ή έως ότου παρατηρηθεί ορατή ανάπτυξη βακτηρίων σε ορισμένα από τα φιαλίδια. Το MIC είναι η συγκέντρωση αντιβιοτικού όπου δεν παρατηρείται ορατή ανάπτυξη βακτηρίων. Η τιμή MIC είναι ένας ελεγχόμενος τρόπος για την αξιολόγηση της μεταβαλλόμενης αντοχής των βακτηριακών στελεχών και θέτει όρια στην αντιβιοτική θεραπεία για λοιμώξεις.